24小时热门版块排行榜    

查看: 5968  |  回复: 12
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

我是传奇456

金虫 (正式写手)

[求助] 请教关于载体中酶切位点和插入片段的问题 已有3人参与

往某载体中插入基因片段,我想请问:
1.两个酶切位点之间相隔10bp,我的插入片段有800左右,这样效率高吗?
2.是否片段大的话,就需要用相隔碱基数较大的两个酶切位点呢?

拜谢!
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bishengwuyi0

新虫 (正式写手)

目的片段和载体都没问题。。。可是就是连不上。。。怎么都连不上,求大虾指点
13楼2021-03-26 23:02:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 13 个回答

lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-14 16:58:17
我是传奇456: 金币+3, ★★★很有帮助, 感谢回答。 2014-02-15 14:32:52
只要酶切处理完全,连接效率会很高。10bp大小足够酶识别酶切位点。
hehe
2楼2014-02-14 16:48:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

2014神虫浮云

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我是传奇456: 金币+2, 有帮助, 多谢回答。 2014-02-15 14:32:40
不行,两个酶切位点距离太近,质粒无法完成双酶切,连接很难成功
ffgtfvtyju7hjhv
3楼2014-02-14 17:29:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我是传奇456: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 感谢回答。 2014-02-15 14:32:22
gyesang: 回帖置顶 2014-02-15 16:54:44
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-02-15 16:54:49
1. 切割效率与使用的限制性内切酶有关。通常情况下,10bp间隔是没有问题的。
2. 酶切效率与插入片段大小无关,片段过大会降低连接转化效率。
4楼2014-02-15 12:24:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 国自然面上复盘~欢迎讨论 (金币+15) +16 晴天加油 2026-08-26 18/900 2026-09-02 09:39 by 昵称告罄
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +3 瞬息宇宙 2026-09-01 5/250 2026-09-02 08:01 by anjeeshine
[文学芳草园] 梦想 +5 myrtle 2026-08-26 8/400 2026-09-02 02:42 by Leogzhya
[基金申请] 面上合作单位盖章 +6 ssyjh 2026-08-27 9/450 2026-09-01 20:01 by huagongfeihu
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +4 瞬息宇宙 2026-08-31 4/200 2026-09-01 14:58 by jiaoxg
[基金申请] 为什么资助数各大高校都创新高,自己申请怎么就这么难 +13 Kittylucky 2026-08-27 14/700 2026-09-01 11:06 by feng6531
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +7 gdd2018 2026-08-28 12/600 2026-09-01 08:32 by 尼古拉斯小虫
[基金申请] 怎么看青基中了没有啊 +6 叶九微 2026-08-26 6/300 2026-08-31 23:54 by yudaoqian88
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +7 雨打竹帘 2026-08-30 11/550 2026-08-31 23:16 by hittle2008
[基金申请] 哪位高人中了,把查询到的截图贴出来让我看看,让我长长见识 +6 yuleib84 2026-08-26 7/350 2026-08-31 19:46 by 鱼翔浅底1
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[基金申请] 基金不中,共勉 +12 eulota 2026-08-26 12/600 2026-08-31 08:42 by ZJTJZ
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 我就是申请一个面上项目而已,这评审意见是按照杰青的条件评的吧? +6 gouxfjh 2026-08-28 11/550 2026-08-30 07:57 by gouxfjh
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
[基金申请] 2026年叶企孙基金 +4 bud_bud 2026-08-27 7/350 2026-08-29 07:23 by foolishmani
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 9/450 2026-08-28 11:06 by maolC
[基金申请] 为什么 国际(地区)合作与交流项目 没有放榜? 10+3 majunge000 2026-08-26 11/550 2026-08-27 08:42 by 北京莱茵编辑
[基金申请] 我不理解! +15 Edward_pc 2026-08-26 23/1150 2026-08-26 20:34 by zzuzxg
信息提示
请填处理意见