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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 溶液配制的问题：溶液中的某种组分指定了pH值，该如何配置？
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dadadei

新虫 (小有名气)

[求助] 溶液配制的问题：溶液中的某种组分指定了pH值，该如何配置？ 已有5人参与

在文献中看到的一种溶液，配方如下：

溶液A ：
10mM HEPES pH7.9,
1.5mM MgCl,
10mM KCl,
0.5mM DTT

我的理解：HEPES是一种缓冲剂，所以要先配置成缓冲液（就像配置不同pH的Tris-HCl缓冲液用于配置其他溶液一样），并调节pH为7.9，作为母液。在配置溶液A时，根据终浓度以及要配置的体积计算所要量取的母液的量。
我的问题是：
①母液的pH用什么调？用NaOH？MgOH？KOH？
②pH7.9是母液的pH还是溶液A的最终pH？如果是母液，那么在配置溶液A的过程中就会稀释，而且母液的初始浓度不同必然会导致稀释倍数的不同，也就不能保证溶液A最终的pH了。

[ Last edited by silicare on 2014-2-17 at 15:07 ]
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1楼 2014-02-14 11:04:04
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bullfrog325

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-14 21:05:16
dadadei: 金币+1, ★有帮助, 谢谢！ 2014-02-17 08:02:35
silicare: MolEPI+1 2014-02-17 09:34:52
"10mM HEPES pH7.9" 意思是最终配好的溶液里面要有HEPES， 浓度为10 mM， pH为7.9. 所以这个7.9是所有东西都加好了过后最后调整的。 用NaOH 或KOH看溶液配方里面其他离子是什么， 楼主的例子里面K多过Mg, 那就用KOH调整pH
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2楼2014-02-14 20:41:39
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by dadadei at 2014-02-17 08:03:49
那母液应该配成多大浓度呢？...

我们一般是10倍体系母液。
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hehe
7楼2014-02-17 08:53:58
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dadadei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bullfrog325 at 2014-02-14 20:41:39
"10mM HEPES pH7.9" 意思是最终配好的溶液里面要有HEPES， 浓度为10 mM， pH为7.9. 所以这个7.9是所有东西都加好了过后最后调整的。 用NaOH 或KOH看溶液配方里面其他离子是什么， 楼主的例子里面K多过Mg, ...

是否有可参考的例子呢？
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3楼2014-02-14 23:14:30
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lvbobo823

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-02-15 16:55:17
dadadei: 金币+1 2014-02-17 21:28:16
HEPES母液用NaOH调PH。我们一般是把母液调成pH7.9 毕竟是缓冲剂，然后再稀释。所以水要用超纯水防止PH变化太大。
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hehe
4楼2014-02-15 09:08:25
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2014神虫浮云

铁虫 (初入文坛)
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 屏蔽内容 2014-02-15 16:55:27
本帖内容被屏蔽
5楼2014-02-15 14:32:21
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dadadei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by lvbobo823 at 2014-02-15 09:08:25
HEPES母液用NaOH调PH。我们一般是把母液调成pH7.9 毕竟是缓冲剂，然后再稀释。所以水要用超纯水防止PH变化太大。

那母液应该配成多大浓度呢？
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6楼2014-02-17 08:03:49
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gao809

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dadadei(gyesang代发): 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-03-30 16:05:27
所有的物质按浓度混合后，再调整pH值至7.9.用KOH调整即可。Hepes是pH值稳定剂，起到缓冲的作用，使溶液的pH维持在的一定范围内。
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8楼2014-02-20 21:51:25
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wangweijian

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

调节pH一般，用NaOH调节；
先配好10mM HEPES pH7.9,然后往里面安要求的浓度加入加MgCl2,KCl,DTT即可，个人认为7.9是HEPES的pH，不是溶液A的最终pH.
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9楼2014-02-20 22:13:05
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dadadei

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by wangweijian at 2014-02-20 22:13:05
调节pH一般，用NaOH调节；
先配好10mM HEPES pH7.9,然后往里面安要求的浓度加入加MgCl2,KCl,DTT即可，个人认为7.9是HEPES的pH，不是溶液A的最终pH.

你的意思是用pH7.9的HEPES溶液去溶解MgCl2,KCl,DTT？
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10楼2014-02-21 15:17:34
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