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lybio金虫 (正式写手)
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[交流]
不需要加入引物进行PCR的问题
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| 分别用两对引物扩增出两条目的DNA片断,这两条链5端和3端有20个互补碱基。现在以扩增出的这两条DNA链,互为模板和引物,不需要另加引物,扩增一段长的链。想请教有经验的人,反应体系一般是怎样的?谢谢! |
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lihegang2000
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reasonspare(金币+1,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
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1.这是该酶说明书: http://www.isload.com.cn/store/u ... 6_2004.pdf/downlaod 它是一种混合酶,保真性介于高保真酶与传统酶之间,它的产物80%末端加A,但还是有20%不加A,重叠延伸就是靠这20% 2.你原来的两个片段是用什么酶扩增的?我是用EX taq酶,也有人用PlusⅡ taq。加了A的片段肯定不能重叠延伸的。 |
12楼2008-01-22 11:18:46
2楼2008-01-18 18:40:59
lybio
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skkyy88888
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