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lybio金虫 (正式写手)
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[交流]
不需要加入引物进行PCR的问题
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| 分别用两对引物扩增出两条目的DNA片断，这两条链5端和3端有20个互补碱基。现在以扩增出的这两条DNA链，互为模板和引物，不需要另加引物，扩增一段长的链。想请教有经验的人，反应体系一般是怎样的？谢谢！ |
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reasonspare(金币+2,VIP+0):xiexie 欢迎常来,.
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无引物PCR应该称作DNA体外同源重组PCR（DNA shuffling），是专门用于进行突变育种。它首先要用DNase I消化功能相同的一组基因片段（A），从而产生随机小片段（B），然后提纯后用无引物PCR（经变性后可互为引物）重新装配这些小片段成完整的大片段。 但楼主说的那个问题不属于无引物PCR，可能涉及到重组PCR，你只是要把两个片段通过PCR的方法连接起来，而没有要突变的意思，对吧？这两个片段虽然有一段互补区，但仍需要一段和两条引物均有互补的区域，也就是说的搭桥引物。好好看看怎么设计重组PCR引物，祝成功。 |
11楼2008-01-22 10:49:26
2楼2008-01-18 18:40:59
lybio
金虫 (正式写手)
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3楼2008-01-18 23:32:26
skkyy88888
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4楼2008-01-19 11:44:17
