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木虫 (正式写手)


[求助] 葡萄糖标准曲线中OD485为负值不知道什么原因,麻烦各位大侠帮忙分析下

我的具体方法是:
称取干燥的葡萄糖0.295g,于EP管中,加入2.95ml蒸馏水,相当于0.1g/ml的葡萄糖,稀释1000倍得到0.1mg/ml的葡萄糖标准溶液,5%苯酚是将苯酚在65水浴锅中融化后吸取2.5ml,用蒸馏水定容50ml配制的,按下面的量加入灭过菌的试管中,水浴煮沸1h,冷却后测OD485

葡萄糖标准溶液(0.1mg/ml)/ml        0        0.1           0.2        0.3          0.4            0.5        0.6
蒸馏水/ml                                                 2       1.9           1.8        1.7           1.6     1.5        1,4
5%苯酚/ml                                          1           1             1                   1                1        1        1       
浓硫酸/ml                                                5           5               5            5                5        5           5
2个平行对照
空白显微弱的粉红色,前几个有的显负值,0.4,0.5,0.6ml葡萄糖中分别有一个管显黄色,大部分显粉红色
另外发酵液外得到的粗胞外多糖颜色深,深红色吧,与空白对照时均未-9999,不知道是不是超过量程了。

这次共做了22个试管,分析了下原因,我是苯酚分别加入后,每个试管加完后加的浓硫酸,难道是因为需要加入苯酚后马上加浓硫酸?
再者为什么平行间有这么大的区别,难道与加入浓硫酸的方式有关?我是沿壁旋转着加入的。
各位有做过这个实验的?求指导。。。
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