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[求助]
葡萄糖标准曲线中OD485为负值不知道什么原因,麻烦各位大侠帮忙分析下
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我的具体方法是: 称取干燥的葡萄糖0.295g,于EP管中,加入2.95ml蒸馏水,相当于0.1g/ml的葡萄糖,稀释1000倍得到0.1mg/ml的葡萄糖标准溶液,5%苯酚是将苯酚在65水浴锅中融化后吸取2.5ml,用蒸馏水定容50ml配制的,按下面的量加入灭过菌的试管中,水浴煮沸1h,冷却后测OD485 葡萄糖标准溶液(0.1mg/ml)/ml 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 蒸馏水/ml 2 1.9 1.8 1.7 1.6 1.5 1,4 5%苯酚/ml 1 1 1 1 1 1 1 浓硫酸/ml 5 5 5 5 5 5 5 2个平行对照 空白显微弱的粉红色,前几个有的显负值,0.4,0.5,0.6ml葡萄糖中分别有一个管显黄色,大部分显粉红色 另外发酵液外得到的粗胞外多糖颜色深,深红色吧,与空白对照时均未-9999,不知道是不是超过量程了。 这次共做了22个试管,分析了下原因,我是苯酚分别加入后,每个试管加完后加的浓硫酸,难道是因为需要加入苯酚后马上加浓硫酸? 再者为什么平行间有这么大的区别,难道与加入浓硫酸的方式有关?我是沿壁旋转着加入的。 各位有做过这个实验的?求指导。。。 |
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