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ruchang2013

铁虫 (初入文坛)

[求助] 基因重组 已有2人参与

基因A重组到质粒pETDuet-1上，成功构建pETDuet-1-A，然后再讲基因B重组到pETDuet-1-A。挑菌、提取质粒验，以质粒为模板进行PCR验证，pETDuet-1-A-B与pETDuet-1-A都能PCR出基因B大小一样的条带，pETDuet-1-A不存在B，为什么以其引物能PCR出同样大小的条带？
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1楼 2014-01-19 15:08:07
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yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ruchang2013: 金币+3, ★★★很有帮助, 谢谢回应 2014-01-20 09:03:41
应该是有重复序列存在吧  可能引物特异性不够
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2楼2014-01-19 21:17:53
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朱多龙

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ruchang2013: 金币+2, ★★★很有帮助, 谢谢回应 2014-01-20 09:04:31
是否有污染，要知道在同一个超净台，或者同一区域，其实都是漂浮着很多质粒或者其他污染物的。出现了这种情况就需要排查了。做空质粒的PCR对照，及其不加模板的空对照。再考虑考虑是否试剂有污染呢。最易被污染的就是水了。
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3楼2014-01-19 21:24:17
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