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donggualily

金虫 (正式写手)

[求助] DGGE空白泳道出现渗漏条带怎么办? 已有2人参与

做了几个月的DGGE了,样品是450-480bp之间的DNA,每次显色后都发现空白泳道中有邻近泳道的类似条带(如图),估计是样品渗漏过来的。推测了各种可能的原因,例如加样方式不当,凝胶时间不足等等,但至今还是没能战胜这种漏样。所以,请求各位高手指点迷津。感激不尽!
DGGE空白泳道出现渗漏条带怎么办?
渗漏1.jpg
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herpanie

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-03-03 15:51:15
我也出现过这种情况。。目前还算解决。。。自己试的办法就是凝胶时候一定要稍微加的多点,让胶孔上沿高度能跟小板平行起码。。这样不容易往两边溢出。还有一个很重要的就是PCR用的酶最好不要用预加染料的,我试过好几种,还是不加染料点样的时候先混上loading buffer沉降的最好,沉降好了自然就不溢了。
6楼2014-03-03 15:12:18
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donggualily

金虫 (正式写手)

最左边的三个泳道和最右边的四个泳道是空白泳道,没有上样。但是也出现了渗漏的条带,求解!
2楼2014-01-17 18:15:55
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donggualily

金虫 (正式写手)

自己顶,盼高手!
3楼2014-01-17 21:57:35
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donggualily

金虫 (正式写手)

继续顶,盼指点!
4楼2014-01-21 22:18:28
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