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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DGGE空白泳道出现渗漏条带怎么办？
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donggualily

金虫 (正式写手)

[求助] DGGE空白泳道出现渗漏条带怎么办？ 已有2人参与

做了几个月的DGGE了，样品是450-480bp之间的DNA，每次显色后都发现空白泳道中有邻近泳道的类似条带（如图），估计是样品渗漏过来的。推测了各种可能的原因，例如加样方式不当，凝胶时间不足等等，但至今还是没能战胜这种漏样。所以，请求各位高手指点迷津。感激不尽！
DGGE空白泳道出现渗漏条带怎么办？
渗漏1.jpg
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1楼 2014-01-17 18:14:36
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donggualily

金虫 (正式写手)
最左边的三个泳道和最右边的四个泳道是空白泳道，没有上样。但是也出现了渗漏的条带，求解！
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2楼2014-01-17 18:15:55
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donggualily

金虫 (正式写手)
自己顶，盼高手！
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3楼2014-01-17 21:57:35
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donggualily

金虫 (正式写手)
继续顶，盼指点！
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4楼2014-01-21 22:18:28
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qiaozheng1

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-03-03 15:51:10
你可以从新配下试剂试试，或者试剂是不是过期了，加凝胶那个成分多加点，还有，电泳的时候，电压，或者电流不要过高，容易挤压变形。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2014-01-22 05:33:58
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herpanie

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-03-03 15:51:15
我也出现过这种情况。。目前还算解决。。。自己试的办法就是凝胶时候一定要稍微加的多点，让胶孔上沿高度能跟小板平行起码。。这样不容易往两边溢出。还有一个很重要的就是PCR用的酶最好不要用预加染料的，我试过好几种，还是不加染料点样的时候先混上loading buffer沉降的最好，沉降好了自然就不溢了。
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6楼2014-03-03 15:12:18
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