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[求助]
紧急求助:细胞周期实验没信号?
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1 试剂材料 PBS,无水乙醇,PBST,PI染料(sigma),受试细胞为Sp2/0 2 步骤 收集药物处理后的细胞及空白对照细胞,2000转离心5 min,去上清。 用预冷的PBS重悬,2000转离心5 min,去上清,重复两次。 离心收集的细胞重悬于300微升预冷的PBS中,然后再缓慢加入700微升预冷的无水乙醇,4度固定过夜。 固定后的细胞离心去上清,用预冷的PBST重悬,2000转离心5 min,去上清,重复两次。 收集的细胞重悬于100微升鞘液中,加5微升PI染液,避光15 min后,加400微升鞘液上机检测。 3 实验结果 上机检测后,无法检测到荧光信号。 PI染料别人用过,没有问题。细胞流速选的中速 。前测散有信号。 求指教:原因何在? |
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