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qfish311

铁虫 (初入文坛)

[交流] 寻找感受态制备的好方法

最近我们实验室的感受态细胞一直都做的不好,最可怕的就是现做现用还可以
,但是一放到-70度冰箱再拿出来使用就不行了,连原质粒转化都不长斑。不知道到底是什么原因,我们用了氯化钙法。和网上找的一种TSB法,都是一样,而且用TSB法的DH5a菌落长的特别的小。
  哪位大虾能有好的,实验室已经用了很久的感受态制备protocol能教我一下吗?谢谢啊!
[search]感受态[/search]
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amilie030312

金虫 (正式写手)

我觉得做感受态的时候最重要的一个是保持低温,尤其是离心的时候用冷冻离心机,一个是绝对的不能污染,我一直用LB培养基CaCl2在做的,效果都不错,如果效果不是很好建议培养基用SOC的,效果会好些。
11楼2008-01-11 14:52:18
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