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踮起脚尖2012

银虫 (小有名气)

[求助] 求助,液液萃取血样,现回收率约35%,该怎么改进呢? 已有3人参与

样品极性大,试验用乙酯和正丁醇萃取血样。
乙酯回收率为,样品37%,内标35%(样品为黄酮类,内标为槲皮素)。正丁醇萃取,样品70%,内标22%。
是不是乙酯回收率太低,而正丁醇的样品和内标回收率差太多呢?
下一步想用混合溶剂试试,暂定乙酯与正丁醇10:1,请问这样合适吗?如不合适,该用什么溶剂呢?
求大神指点啊!!!
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rosegarden

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

1.通常会用甲酸和乙酸,甲酸的酸性强于乙酸。
你的样品对酸敏感,你可以先试试乙酸。
没有做过中药,心里没有底,你可以试试0.1%的乙酸,加20ul,如果没有效果再考虑增加酸的浓度。
2.至于你说的流动相没有加酸是不是影响回收率,既然峰形不好,你为什么不再优化一下你的色谱条件?
你可以做个对照组,看下流动相里面加酸会增大响应
坚持
13楼2014-01-09 16:30:50
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rosegarden

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
踮起脚尖2012: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-01-13 14:11:49
黄酮类有酚羟基或者羧基,槲皮素也有酚羟基,显一定酸性。
你可以试试在血浆里面加酸,看看能不能增加提取回收率。
酸的量和浓度根据你血浆用量来。
坚持
2楼2014-01-07 15:32:54
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liuzhaomin

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
踮起脚尖2012: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-01-13 14:11:57
如果70%的回收满意的话,可以考虑换个内标
3楼2014-01-07 16:08:03
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踮起脚尖2012

银虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by liuzhaomin at 2014-01-07 16:08:03
如果70%的回收满意的话,可以考虑换个内标

可以考虑,就是找个内标很难的啊?
4楼2014-01-07 17:34:24
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