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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 高人请进，关于FISH实验中多聚甲醛的固定
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圣迭戈

铜虫 (小有名气)

[求助] 高人请进，关于FISH实验中多聚甲醛的固定 已有1人参与

最近打算做微生物的FISH，看文献上说先用4%的多聚甲醛固定之后再过膜（相当于是收集细胞），然后杂交什么的。
这里我就有疑惑了，固定的时候在直接把多聚甲醛加到培养基当中吗？如果不是这样的话怎么操作？
注：大家可能会说先离心，再加固定液。但是离心在这里没用的。由于细胞太小，而且密度低，离心之后看不见细胞沉淀。。。
求高人指点啊。。有帮助的话还可以加金币。。
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1楼 2014-01-02 11:37:35
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muji9908

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励应助！ 2014-01-03 16:33:16
圣迭戈: 金币+50, ★★★★★最佳答案 2014-01-04 21:48:26
你把细菌过滤到膜上，然后在膜上做fish就好了
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2楼2014-01-03 11:11:36
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圣迭戈

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by muji9908 at 2014-01-03 11:11:36
你把细菌过滤到膜上，然后在膜上做fish就好了

但FISH之前不是应该先固定吗？我想问的是固定这步是在哪里做？膜上还是离心管里面？
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3楼2014-01-04 17:29:38
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muji9908

铁虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

膜上固定，你在膜底下放300-500 ul 多聚甲醛
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4楼2014-01-04 18:19:20
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圣迭戈

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by muji9908 at 2014-01-04 18:19:20
膜上固定，你在膜底下放300-500 ul 多聚甲醛

是过膜之后把膜拿出来放在多聚甲醛上吗？
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5楼2014-01-04 21:48:05
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muji9908

铁虫 (小有名气)
对，放在培养盘里，4度过夜

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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6楼2014-01-05 13:47:20
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