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a3200649

铜虫 (正式写手)

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[求助] 做细菌的双重荧光pcr 已有1人参与

请问做2种细菌的双重荧光pcr，我用的是菌种，必须要制备标准品吗（进行PCR扩增，并将目的片段克隆于pMD18-T，
构建重组质粒，提取质粒进行PCR分析和测序验证）？必须要这一步吗？

如果不制备标准品，直接提取菌种DNA，然后并利用OD260nm/OD280nm比值来确定DNA的纯度，然后进行梯度稀释，测检测限，这样可以吗？

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希望大家多多交流

1楼 2014-01-02 09:14:51

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a3200649

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引用回帖:

13楼: Originally posted by sxxuan at 2014-01-03 11:58:45
那外文用什么作为对照？...

没有对照啊，我看了好几篇，关于设计普通pcr引物的一个问题，我查到一个特异性基因序列，然后从里面找了一小段序列（位置1600-1650），然后设计的时候就针对这一小段序列吗？还是大于这一小段序列来设计（也就是例如1580-1660）来设计呢？
论文发表的时候关于与引物探针与其他的文章一样会算做抄袭吗？