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舒影清浅

木虫 (初入文坛)

[求助] RGD标记壳聚糖 已有1人参与

想做关于RGD标记壳聚糖的工作,但是一直标记不了,哪位高手做过类似的实验?求具体指导

[ Last edited by 红舟流星 on 2014-1-2 at 07:14 ]
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duruo

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【答案】应助回帖

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舒影清浅: 金币+15, 有帮助 2014-01-02 09:17:53
markar: 金币+1, 感谢回帖交流! 2014-01-03 22:02:02
这个问题经常见
其实壳聚糖的胺基修饰并不容易,除了生成希夫碱以外其他的反应很难实现它的衍生化
原因很简单,胺基修饰往往基于它的亲核能力,但壳聚糖溶液往往是酸性的,它的胺基被质子化,所以失去了亲核能力

所以,解决你的问题有两种方法:
1、用壳聚糖衍生物,使得其在碱性条件下可以溶解;
2、将你的肽连上一个醛酮的结构,利用希夫碱和壳聚糖反应。
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
2楼2014-01-02 08:59:14
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qiang100

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by duruo at 2014-01-02 08:59:14
这个问题经常见
其实壳聚糖的胺基修饰并不容易,除了生成希夫碱以外其他的反应很难实现它的衍生化
原因很简单,胺基修饰往往基于它的亲核能力,但壳聚糖溶液往往是酸性的,它的胺基被质子化,所以失去了亲核能力
...

我想问下,就是RGD修饰到了壳聚糖的衍生物上,用什么检测方法确定RGD修饰到了壳聚糖的衍生物上,核磁检测看不出来怎么办啊。
想要与得到相差做到
3楼2014-01-02 09:30:11
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duruo

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引用回帖:
3楼: Originally posted by qiang100 at 2014-01-02 09:30:11
我想问下,就是RGD修饰到了壳聚糖的衍生物上,用什么检测方法确定RGD修饰到了壳聚糖的衍生物上,核磁检测看不出来怎么办啊。...

一般的选择是使用元素分析(虽然它的误差非常大)

比较准确的是使用放射性标记RGD(由于安全性原因,不推荐)
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
4楼2014-01-02 10:38:47
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舒影清浅

木虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by qiang100 at 2014-01-02 09:30:11
我想问下,就是RGD修饰到了壳聚糖的衍生物上,用什么检测方法确定RGD修饰到了壳聚糖的衍生物上,核磁检测看不出来怎么办啊。...

我使用的RGD是FITC标记的 可以荧光检测
5楼2014-01-03 10:23:44
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duruo

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【答案】应助回帖


markar: 金币+1, 应助指数+1, 感谢回帖交流! 2014-01-03 22:02:14
引用回帖:
5楼: Originally posted by 舒影清浅 at 2014-01-03 10:23:44
我使用的RGD是FITC标记的 可以荧光检测...

FITC相对RGD来说有点大了,位阻效应肯定会影响它的反应效率

不过如果只想定性或半定量分析一下,也是可以的
能攻心则反侧自消,从古知兵非好战;不审势即宽严皆误,后来治蜀要深思
6楼2014-01-03 11:10:24
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