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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 血液离心后血清成果冻状原因
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xiaoping1986

银虫 (著名写手)

[求助] 血液离心后血清成果冻状原因 已有1人参与

请问我从小鼠取的鲜血，加入0.1ml的3.2%的柠檬酸三钠抗凝剂，2500g离心15min后放入-20冰箱保存，使用时37度迅速水浴解冻，放在室温下备用，用的时候发现有果冻状的物质（解冻后室温下大概放置了1小时）。
请问这是怎么回事？
有果冻状物质后血浆还能用吗？如果是做凝血4项检查（APTT,PT,TT,FIB）？
是不是解冻后也要放在冰上，不能放室温？
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1楼 2013-12-27 20:29:11
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xiaoli7130

禁虫 (小有名气)
感谢参与，应助指数 +1
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2楼2013-12-30 13:26:25
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xiaoping1986

银虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by xiaoli7130 at 2013-12-30 13:26:25
加入抗凝剂的血，离心后得到的是血浆，而不是血清。正常血浆的离心方法是：加入抗凝剂后，取过鲜血后，立即迅速混匀（上下颠倒，或轻微弹离心管底部）。然后室温静置1h,4℃放置1h,3500r/min   10min就行了。
取上清 ...

请问取血后为什么不能马上离心？离心时需要4度吗？
您说采血不畅是什么意思？我是小鼠摘除眼球取的血？
那这样的血是不是不能用了？
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3楼2013-12-31 08:51:46
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xiaoli7130

禁虫 (小有名气)
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4楼2013-12-31 09:34:56
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xiaoping1986

银虫 (著名写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by xiaoli7130 at 2013-12-31 09:34:56
放室温或37℃温箱温浴及后面的4℃是为了让血液内纤维蛋白原收缩,降低血浆和红细胞的粘连,从而使使血清更容易于红细胞分离,不易产生溶血现象。摘眼球取血是可以的，取血清的话还行。但是如果你要取血浆就不行了，血 ...

我是先在EP管中加入0.1ml的抗凝剂的，然后摘除眼球后将血滴入已有抗凝剂的EP管中的，这样取的话，摘除眼球取血到后面前面的也会凝血是吗？
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5楼2014-01-01 09:55:28
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xiaoli7130

禁虫 (小有名气)
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6楼2014-01-01 14:25:14
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xiaoping1986

银虫 (著名写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by xiaoli7130 at 2014-01-01 14:25:14
因为眼球取血的过程有点长，在取后面的时候前面的可能凝了，你取完的时候，混匀时看看有没有血块。0.1ml的抗凝剂也太多了，你想一下血浆最多占血液的1/2~3/5，一下加0.1ml,对血浆含有量有影响，这个看浓度和单位的 ...

我取完血后上下颠倒好像没有发现血块，离心后取上清时也没有发现异常，就是冻完解冻后发现有凝块了？
我买的试剂盒上写的是1份抗凝剂9份全血，所以我就加了0.1ml抗凝剂，滴入0.9ml血。
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7楼2014-01-01 23:38:36
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xiaoli7130

禁虫 (小有名气)
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8楼2014-01-02 10:57:11
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xiaoping1986

银虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xiaoli7130 at 2014-01-02 10:57:11
猜测是因为抗凝不充分或没有立即离心（或二者皆有）导致一部分凝血反应被激活，血液凝固，纤维蛋白原转变为纤维蛋白，凝结成块，形成胶冻（此时上清液可能是血浆和血清的混合体，起码有一部分是血清）,有时还没有冬 ...

请问是不是取血后要立即上下混匀，然后马上离心是吗？离心时还需要低温离心吗？
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9楼2014-01-02 13:36:07
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xiaoping1986

银虫 (著名写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by xiaoli7130 at 2014-01-02 10:57:11
猜测是因为抗凝不充分或没有立即离心（或二者皆有）导致一部分凝血反应被激活，血液凝固，纤维蛋白原转变为纤维蛋白，凝结成块，形成胶冻（此时上清液可能是血浆和血清的混合体，起码有一部分是血清）,有时还没有冬 ...

请问上清液时血浆和血清的混合体是什么意思？怎么样才能避免？
我这里实验要怎么样正确操作才能避免形成胶冻这种情况呢？
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10楼2014-01-02 13:37:29
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