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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 化学分析 » 用c18跑生物碱对照品，但在45分钟后总有其它峰，那些是什么峰，怎么办。
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是谁再一次

金虫 (正式写手)
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10楼: Originally posted by lifucheng at 2014-02-10 10:03:45
那是不是梯度峰啊？...

走梯度不会有这样的峰吧。你看我的梯度，可能会出现这种峰吗？
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11楼2014-02-10 12:44:31
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)
★
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40-50min的杂峰有点像是梯度峰 因为在10min内变化了25% 50-60min感觉是脏东西被冲出来了 因为这个时候有机相比例大 此外 楼主走等度有这些峰没有呢？
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12楼2014-02-10 13:05:24
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是谁再一次

金虫 (正式写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by lifucheng at 2014-02-10 13:05:24
40-50min的杂峰有点像是梯度峰 因为在10min内变化了25% 50-60min感觉是脏东西被冲出来了 因为这个时候有机相比例大 此外 楼主走等度有这些峰没有呢？

走100甲醇等度的时候没有。每次进样前我都会先冲半小时的百分百的甲醇，线是平的。
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13楼2014-02-10 13:12:26
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suruiqin

版主 (知名作家)
★
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你这个梯度设置的有问题，一般我们不会让泵跑单纯的水相的，因为水相和有机相混合时会有气泡产生，还有就是缓冲盐容易析晶，还有就是你的梯度貌似设置的有点问题，你的样品有几个移至杂质啊，怎么40-45min设置的那么频繁？
建议把初始流动相改成甲醇及15%甲醇（0.2%缓冲盐），还有如果后面的梯度看着略调一下，怀疑你的梯度峰太多会影响你的杂质检测
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所有的成就都源于新的挑战
14楼2014-02-10 13:18:47
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是谁再一次

金虫 (正式写手)
引用回帖:
14楼: Originally posted by suruiqin at 2014-02-10 13:18:47
你这个梯度设置的有问题，一般我们不会让泵跑单纯的水相的，因为水相和有机相混合时会有气泡产生，还有就是缓冲盐容易析晶，还有就是你的梯度貌似设置的有点问题，你的样品有几个移至杂质啊，怎么40-45min设置的那么 ...

这个图是一开始摸条件时的结果，用的是15%甲醇-缓冲盐溶液到90%甲醇-缓冲盐溶液。当时不知道那个位置有杂峰，以为是成分峰没有分开，所以才继续调的。这个样品有什么样的峰不清楚，因为没有人做过。
用c18跑生物碱对照品，但在45分钟后总有其它峰，那些是什么峰，怎么办。
15-90.jpg
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15楼2014-02-10 15:06:33
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suruiqin

版主 (知名作家)
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15楼: Originally posted by 是谁再一次 at 2014-02-10 15:06:33
这个图是一开始摸条件时的结果，用的是15%甲醇-缓冲盐溶液到90%甲醇-缓冲盐溶液。当时不知道那个位置有杂峰，以为是成分峰没有分开，所以才继续调的。这个样品有什么样的峰不清楚，因为没有人做过。

15-90.jpg
...

梯度峰有没有影响，应该先跑梯度看看，然后跑空白，最后跑样品，我们做实验一般每天都会先跑一针梯度，再跑空白，然后再跑其他的，单纯看样品图是无法判断的
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16楼2014-02-10 15:16:53
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是谁再一次

金虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by suruiqin at 2014-02-10 15:16:53
梯度峰有没有影响，应该先跑梯度看看，然后跑空白，最后跑样品，我们做实验一般每天都会先跑一针梯度，再跑空白，然后再跑其他的，单纯看样品图是无法判断的...

就是说这些杂峰有可能是梯度峰，也有可能是柱子里或哪里的杂质峰，是吗？
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17楼2014-02-10 15:18:54
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suruiqin

版主 (知名作家)
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17楼: Originally posted by 是谁再一次 at 2014-02-10 15:18:54
就是说这些杂峰有可能是梯度峰，也有可能是柱子里或哪里的杂质峰，是吗？...

一般柱子里的杂质不会这么多的，我怀疑是梯度峰，反正设置梯度的准则一般是能把杂质尽量在一种流动相中体现出来，再就是梯度不能影响杂质检测
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18楼2014-02-10 15:27:56
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是谁再一次

金虫 (正式写手)
谢谢两位了，那就是梯度峰了。只是我奇怪，这梯度峰怎么能如此多而且这么像是成分的峰。
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19楼2014-02-10 15:33:30
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是谁再一次

金虫 (正式写手)
还有就是一开始我是用50%甲醇等度洗脱的，如图结果，明明很快都已经出来完了，换成梯度洗脱，明明甲醇后面的浓度高了，为什么反而出来慢。
用c18跑生物碱对照品，但在45分钟后总有其它峰，那些是什么峰，怎么办。-1
50甲醇等度洗脱.jpg
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20楼2014-02-10 15:49:28
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