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是谁再一次

金虫 (正式写手)

[交流] 用c18跑生物碱对照品,但在45分钟后总有其它峰,那些是什么峰,怎么办。 已有5人参与

如下三张图片,第一张是对照品的结果,应该只有一个峰,但是后面还有好多杂峰。再跑一空白溶剂,结果在那个位置还是有峰。后来换用色谱甲醇来制备,对照品用量增加,明显高出后面那些杂峰,但杂峰依然存在。第三张是我的梯度。我在想,会不会是我流动相的问题。流动相是甲醇和%0.2磷酸水溶液(用三乙胺调ph至7).
用c18跑生物碱对照品,但在45分钟后总有其它峰,那些是什么峰,怎么办。
原阿片碱.jpg


用c18跑生物碱对照品,但在45分钟后总有其它峰,那些是什么峰,怎么办。-1
空白.jpg


用c18跑生物碱对照品,但在45分钟后总有其它峰,那些是什么峰,怎么办。-2
梯度.jpg
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suruiqin

版主 (知名作家)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
你这个梯度设置的有问题,一般我们不会让泵跑单纯的水相的,因为水相和有机相混合时会有气泡产生,还有就是缓冲盐容易析晶,还有就是你的梯度貌似设置的有点问题,你的样品有几个移至杂质啊,怎么40-45min设置的那么频繁?
建议把初始流动相改成甲醇及15%甲醇(0.2%缓冲盐),还有如果后面的梯度看着略调一下,怀疑你的梯度峰太多会影响你的杂质检测
所有的成就都源于新的挑战
14楼2014-02-10 13:18:47
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是谁再一次

金虫 (正式写手)

补充一下,这是用日立的高效液相仪做的。还有一个问题,因为我的流动相里有缓冲盐,所以在实验做完后都用5%甲醇-水来冲半小时,不知道对不对,在网上有看以说水的比例不能过大的。
2楼2013-12-26 15:43:43
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lifucheng

专家顾问 (知名作家)

★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
suruiqin: 金币+5, 专家辛苦了,感谢交流~ 2014-02-10 13:28:00
你的液相能不能走空针 如果能的话走空针试一试 如果没有那个杂峰 就是你稀释剂的问题了 5%甲醇-水来冲半小时可以 因为你是在冲盐 而不是走样品 最后要用甲醇来保存柱子哈
3楼2013-12-26 16:08:08
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e_liang369

金虫 (正式写手)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
流动相不是很干净。
悲催的研发!
4楼2013-12-27 09:23:32
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