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worldbetter至尊木虫 (著名写手)
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如何鉴定细菌的DNA受损状况？已有2人参与
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我做的实验是杀菌，现在想看看杀菌后大肠杆菌的DNA受损状况。 有人说用糖琼脂凝胶电泳能够看出长链DNA变成短的链了，我不需要达到很精确的效果，这种方法可以么？基本步骤怎么做？ 然后，如果我希望研究哪些位点容易受到这种杀菌因素的攻击，是不是得测序？ |
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2楼2013-12-26 09:38:01
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
worldbetter: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 谢谢。 2013-12-26 17:04:34
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有一种称为"单细胞ＤＮＡ损伤微凝胶慧星（Comet assay）检测术“的方法，应该符合你的研究目的。 该检测法又称为单细胞凝胶电泳检测术（SCGE）或微凝胶电泳检测术，是基于电场条件下，完整超螺旋DNA保持在细胞内，而变性损伤的DNA片段，可从细胞中移出的原理。凝胶电泳后，呈现分子迁移图形，形成彗星拖尾（comet tail）现象，完整DNA染色体为“头”，而松散和断裂的DNA为“尾”，以此评价DNA损伤程度。 该法是分析单一细胞DNA链断裂的敏感方法之一。其适用于新鲜细菌或细胞的DNA 损伤研究，包括DNA 链断裂、DNA 剪切损伤、DNA 交联等，目前已应用于细菌的环境毒理学、放射学和抗生素敏感性研究等多领域。 《药理学通报》上有一篇综述，感兴趣，可以参考一下：单细胞DNA损伤的微凝胶慧星电泳检测法-《中国药理学通报》，不过好像是九几年的一篇，而且主要针对真核细胞的。 另外，这种检测法，现在应该有专门试剂盒卖。可自行上网搜下。 |
3楼2013-12-26 10:43:20
worldbetter
至尊木虫 (著名写手)
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