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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 多糖沉淀后，用无水乙醇洗涤，真空干燥，结果制得的多糖黏在滤纸上刮不下来怎么办？
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zhnvren

铁虫 (小有名气)

[交流] 多糖沉淀后，用无水乙醇洗涤，真空干燥，结果制得的多糖黏在滤纸上刮不下来怎么办？已有5人参与

多糖沉淀后，用无水乙醇、丙酮、乙醚布氏漏斗洗涤数次，真空干燥，结果制得的多糖结晶黏在滤纸上刮不下来怎么办（不经过真空干燥的多糖也是黏在滤纸上下不来）？我需要把制得的多糖拿下来称重计算含量以及后续的供试品制备。或者说换一种方法，用离心，加无水乙醇洗多糖沉淀行不行？如何操作？
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1楼2013-12-25 20:53:49
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

chenyayun

金虫 (小有名气)
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我之前是直接装在10ml管子里冻干的，多糖吸气非常快，干了立马盖盖子

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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有善始者实繁，能克终者盖寡。
4楼2013-12-26 23:53:37
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FTD顺

金虫 (小有名气)
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3楼: Originally posted by zhnvren at 2013-12-26 21:50:10
①用滤布的话还是有损失啊，文献多糖含量是20%左右，而我最多的一次才12%。②洗涤的时候布氏漏斗两下子就把滤纸抽干了，含水太少了扣不下来。③干燥后是细小的一粒一粒的结晶体，我把滤纸对折企图碾碎，结果发现太 ...

刮不下来是因为量少啊，非常薄的一层。那么粘的东西，你刮下来也会带着滤纸碎屑。滤纸加滤布不妨一试，或者先用滤布（加厚加密的）就算不行也只是全漏下去而已。
你换小点的漏斗也可以一试。
离心感觉可行。洗涤也是像你说的那么洗的。
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6楼2013-12-27 09:08:30
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xypqust

金虫 (小有名气)
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我也做过多糖，一开始也碰到过类似情况。这东西很难分。一般是过柱子后，真空干燥或者冻干
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16楼2014-01-10 09:25:26
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FTD顺

金虫 (小有名气)
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滤纸上面垫滤布，或者直接换滤布，应该会好点。
再有 你洗涤的时候，打浆充分点，含水少应该也会比较好。感觉你现在干燥后应该是大块的，而且不容易碾碎。
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2楼2013-12-26 10:35:41
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zhnvren

铁虫 (小有名气)
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2楼: Originally posted by FTD顺 at 2013-12-26 10:35:41
滤纸上面垫滤布，或者直接换滤布，应该会好点。
再有 你洗涤的时候，打浆充分点，含水少应该也会比较好。感觉你现在干燥后应该是大块的，而且不容易碾碎。

①用滤布的话还是有损失啊，文献多糖含量是20%左右，而我最多的一次才12%。②洗涤的时候布氏漏斗两下子就把滤纸抽干了，含水太少了扣不下来。③干燥后是细小的一粒一粒的结晶体，我把滤纸对折企图碾碎，结果发现太硬了，不好碾，碾碎的碎末会撒出来到桌面上。④最后想到用离心，还没尝试过，洗涤的话，我想会不会把无水乙醇倒入离心管里用玻璃棒搅搅，再离心？反复多次？这样可否？
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3楼2013-12-26 21:50:10
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chenyayun

金虫 (小有名气)
吸潮

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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有善始者实繁，能克终者盖寡。
5楼2013-12-26 23:54:16
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zhnvren

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by chenyayun at 2013-12-26 23:53:37
我之前是直接装在10ml管子里冻干的，多糖吸气非常快，干了立马盖盖子

真心谢谢回帖提供方法。不过实验室简陋了点，木有冷冻干燥机。
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7楼2013-12-31 22:56:17
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zhnvren

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by FTD顺 at 2013-12-27 09:08:30
刮不下来是因为量少啊，非常薄的一层。那么粘的东西，你刮下来也会带着滤纸碎屑。滤纸加滤布不妨一试，或者先用滤布（加厚加密的）就算不行也只是全漏下去而已。
你换小点的漏斗也可以一试。
离心感觉可行。洗涤 ...

我也感觉离心可以，准备一试，不知道是什么情况，希望离心管好扣一些。感谢回复。
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8楼2013-12-31 22:59:18
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zhnvren

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
6楼: Originally posted by FTD顺 at 2013-12-27 09:08:30
刮不下来是因为量少啊，非常薄的一层。那么粘的东西，你刮下来也会带着滤纸碎屑。滤纸加滤布不妨一试，或者先用滤布（加厚加密的）就算不行也只是全漏下去而已。
你换小点的漏斗也可以一试。
离心感觉可行。洗涤 ...

多糖的量真的不能再多了。因为我实验中有这么一步是除蛋白后的上清液加无水乙醇配成终浓度为85%的乙醇沉淀。这步要求的无水乙醇量好像很大。只好取上清液10ml加85ml95%醇配成85%醇溶液再放冰箱一晚上沉淀，第二天得到多糖。上清液取多的话，加的无水乙醇要多得多，是不是？所以我最后只能用10ml中的多糖量来推算回去总的多糖量，不知道这样误差大吗？
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9楼2013-12-31 23:10:43
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tianhaikuo

木虫 (著名写手)

JYM
★
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用溶剂将滤纸上的多糖溶解下来，重新醇沉、真空干燥，不能再用滤纸过滤。
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学无止境，学以致用。
10楼2014-01-01 10:30:53
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