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ljj0720

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[求助] 引物中有2个起始密码子已有4人参与

我在做原核表达，设计引物的时候，上游引物出现2个起始密码子，可以吗
S: S: 5’ ATGCTCAATTTTATGACAAAG 3’

[ Last edited by ljj0720 on 2013-12-25 at 13:29 ]

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1楼 2013-12-25 13:28:51

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gaoshandian1

金虫 (小有名气)

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gyesang: 金币+5, 鼓励交流！ 2013-12-28 20:58:00
gyesang: 回帖置顶 2013-12-28 20:58:02

楼主要小心了，看你的引物上游用了ECORI酶切位点。酶切位点不是直接加上就行的。还要看载体的这个酶切位点是怎么编码氨基酸的。比方说载体上是AGA ATT CAA 这样的，你的引物就不能用。另外，这是原核表达。就别再在这里讨论KOZAK序列了

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15楼2013-12-28 14:27:27

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ljj0720

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引用回帖:

2楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-25 15:24:33
引物里是否包括酶切位点和保护碱基？第二个ATG是目的基因的起始？如果你最终克隆到载体里的序列有两个相近的ATG，会造成不同的起始，不过你的两个ATG是in frame的，应该没有问题。

您帮我i再看看吧谢谢

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4楼2013-12-25 18:39:34

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