应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 网络生活区 » 有奖问答 » 实验讨论 » 细菌耐药质粒的PFGE
61/1返回列表
查看: 1197  |  回复: 5
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

刘仁坤2013

新虫 (小有名气)

[求助] 细菌耐药质粒的PFGE

最近本人正在做耐药细菌质粒的PFGE，拿到了三株大肠杆菌(含有已知大小的质粒），打算让他们做MARKER，依次为R1，R27，V517。打算先跑这三株标准菌株看看情况在跑样品菌株，但总是出现问题，电泳图如下，望大家多帮忙。实验条件是酶切体系100ul,S1核酸酶20U，酶切20分钟，细菌是大肠杆菌R1，R27，V517。PFGE条件是6V/CM,起始秒1S，结束秒25S，总时间是24小时。
首先我想问一个问题：不同的细菌可以用S1核酸酶切吗？条件都相同吗？
细菌耐药质粒的PFGE
2013-12-24,R1,R27,V517-2.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-12-25 09:33:49
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仁坤2013

新虫 (小有名气)
还有一个问题，电泳条带是拖尾现象，是由于酶切切过了呢，还是切的不够啊？自己顶一下。
赞一下 回复此楼
2楼2013-12-25 09:40:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仁坤2013

新虫 (小有名气)
电泳条件： 6V/CM,起始秒1S，结束秒25S，总时间是13小时。
MARKER为低范围PFG Marker(192KB-2.03KB)
琼脂糖凝胶是Pulsed Field Certified Agarose
标本为大肠杆菌V517
1-7泳道，酶量20U,酶切时间依次为5,10,20,30,40,50,60（分钟）
8-14泳道，酶切时间为30分钟，酶量依次为5,10,15,20,25,30,35U。
电泳图如下
赞一下 回复此楼
3楼2014-01-06 17:14:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

志民

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

胶都有问题   看你的胶孔  东倒西歪的
赞一下 回复此楼
4楼2017-01-07 23:04:16
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘仁坤2013

新虫 (小有名气)
恩！

发自小木虫Android客户端
5楼2017-01-09 10:47:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

长清1993

新虫 (初入文坛)
可能你的小胶块在倒胶的时候被冲得偏离了位置

发自小木虫Android客户端
赞一下 回复此楼
6楼2017-09-19 10:39:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 刘仁坤2013 的主题更新
61/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 288求调剂 +3 于海海海海 2026-03-19 3/150 2026-03-19 10:38 by 有只狸奴
[考研] 材料080500调剂求收留 +4 一颗meteor 2026-03-13 4/200 2026-03-19 10:32 by 30660438
[考研] 材料专硕英一数二306 +5 z1z2z3879 2026-03-18 5/250 2026-03-19 07:43 by BruceLiu320
[考研] 085600材料与化工调剂 324分 +9 llllkkkhh 2026-03-18 9/450 2026-03-19 07:40 by BruceLiu320
[考研] 0703化学调剂 +4 pupcoco 2026-03-17 7/350 2026-03-18 12:14 by djl2006
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +6 困于星晨 2026-03-17 6/300 2026-03-18 10:21 by kkcoco25
[考研] 生物学071000 329分求调剂 +3 我爱生物生物爱� 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:12 by macy2011
[考研] 考研求调剂 +3 橘颂. 2026-03-17 4/200 2026-03-17 21:43 by 有只狸奴
[考研] 277调剂 +5 自由煎饼果子 2026-03-16 6/300 2026-03-17 19:26 by 李leezz
[考研] 一志愿苏州大学材料工程（085601）专硕有科研经历三项国奖两个实用型专利一项省级立项 +6 大火山小火山 2026-03-16 8/400 2026-03-17 15:05 by 无懈可击111
[考研] 290求调剂 +6 孔志浩 2026-03-12 11/550 2026-03-17 14:41 by 周舟舟77
[考研] 一志愿南京大学，080500材料科学与工程，调剂 +4 Jy? 2026-03-16 4/200 2026-03-17 11:02 by gaoqiong
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 0703一志愿211 285分求调剂 +5 ly3471z 2026-03-13 5/250 2026-03-16 16:16 by 哦哦123
[考研] 0856专硕279求调剂 +5 加油加油！? 2026-03-15 5/250 2026-03-15 11:58 by 2020015
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 255求调剂 +3 李嘉慧， 2026-03-12 4/200 2026-03-14 16:58 by 有只狸奴
[考研] 复试调剂 +3 呼呼？~+123456 2026-03-14 3/150 2026-03-14 16:53 by WTUChen
[考研] 328求调剂 +3 5201314Lsy！ 2026-03-13 6/300 2026-03-14 15:31 by hyswxzs
[考研] 308求调剂 +3 是Lupa啊 2026-03-12 3/150 2026-03-13 14:30 by 求调剂zz
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭