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不夜得孤独

铜虫 (小有名气)

[求助] 如何在含有耐药性的细菌中进行质粒转导

目前有一株细菌菌株,构建的GFP质粒中有四环素和氨苄两个抗生素标记,  想要把GFP质粒导入到细菌菌株中。可是这个细菌岁四环素和氨苄都不敏感。  无法筛选出阳性克隆。    谁有办法帮忙解决,感谢。  


   另外是否还有其他办法可以让细菌带上可以识别,且能遗传的标记物(除了GFP)
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278085565

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励交流! 2012-12-07 21:21:17
可以利用限制性内切酶以及连接酶等往细菌菌株中植入四环素敏感基因
爱你,是我的无悔选择!
2楼2012-12-07 16:59:23
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quxd

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
换载体,否则别无他法。
3楼2012-12-07 20:50:10
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兔小白

铁虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
可以再载体上加入细菌敏感的其他抗性基因 比如链霉素抗性基因 试试看吧
4楼2012-12-08 08:51:45
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不夜得孤独

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 278085565 at 2012-12-07 16:59:23
可以利用限制性内切酶以及连接酶等往细菌菌株中植入四环素敏感基因

这个导入敏感基因需要多少时间?操作性怎样?
5楼2012-12-08 15:16:46
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