[交流] EMSA技术 已有1人参与

从去年开始做EMSA，有成功的，有做不出来的，最近几次做的效果一直不好。。。     我用的是赛默飞的EMSA试剂盒，biotin探针试剂盒也是赛默飞的，抽核蛋白也是赛默飞的kit，最近做出来的都是只有引物带没有binding？？ 1 我用的是4%的非变性凝胶 2 反应体系里面把试剂盒给出的optional的都加了    50%甘油   1ul    1%NP40    1ul     1M KCL      1ul     100mM Mgcl2    。。     200mM EDTA   。。      dI.dC。。      DTT  。。     10*binding buffer  2ul     biotin-DNA   2ul     核蛋白   5ug    20ul体系 室温30min 电泳 3 电泳 100v 溴酚蓝到底 4 转膜 380mA 60min 剩下的操作都是和试剂盒中一样，但就是只有游离探针的带。。。 哪里会有问题呢？ ps这个探针以前用过，可以binding下来的 [ Last edited by silicare on 2014-2-26 at 16:32 ]

回复此楼

» 猜你喜欢

• 筑牢营养安全线：以精准检测，护健康基石 已经有0人回复
• 推荐一些20种氨基酸检测的实际应用案例 已经有0人回复
• 化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费? 已经有206人回复
• 不合理蛙科研实验中的趣事：实验器材的 “乌龙” 已经有0人回复
• 不合理蛙科研实验中的趣事：和实验材料的 “斗智斗勇” 已经有0人回复
• 蛋白质检测：精准分析，解锁生物分子的密码 已经有0人回复
• 不合理蛙科研实验之小鼠实验：严谨设计，解析生命机制的重要载体 已经有0人回复
• 不合理蛙科研实验之重金属检测：精准筛查，守护健康与环境的防线 已经有0人回复
• 不合理蛙科研实验之“蛙测重金属我背锅三千” 已经有0人回复
• 不合理蛙科研实验之“鼠逃三次我发三篇SCI” 已经有0人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

高级回复