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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Touch Down PCR
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摩羯的心

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 海豚湾小鱼 at 2013-12-26 09:29:07
建议做完一次Touch down后，再做一次二次pcr。

现在做完touch down 之后一条带都没有啊
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11楼2013-12-26 11:12:27
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摩羯的心

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by woshishui916 at 2013-12-25 16:28:08
是的
不过加了点保护剂...

能说一下保护剂是什么吗
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12楼2013-12-26 11:12:44
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woshishui916

木虫 (著名写手)
引用回帖:
12楼: Originally posted by 摩羯的心 at 2013-12-26 11:12:44
能说一下保护剂是什么吗...

试剂盒里的Mix?
你查下酶的保护剂就好了
不过mix都只能保证一般的样品，个别困难的样品最好还是自己优化了
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13楼2013-12-26 11:31:55
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我做过降落PCR，遇到这种情况的时候  建议1.适当增加引物浓度，2.直接做一次二次pcr
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生命不息奋斗不止
14楼2013-12-26 18:21:58
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by 摩羯的心 at 2013-12-26 11:12:27
现在做完touch down 之后一条带都没有啊...

楼主认识有一个误区，没有条带不意味着一定没有扩出核苷酸序列，当条带很弱的时候比如就只有几条的时候，EB染色基本看不到条带，所以做一次二次pcr是必要的。
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生命不息奋斗不止
15楼2013-12-26 18:24:43
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摩羯的心

铁虫 (小有名气)
引用回帖:
15楼: Originally posted by 冷雁孤旅 at 2013-12-26 18:24:43
楼主认识有一个误区，没有条带不意味着一定没有扩出核苷酸序列，当条带很弱的时候比如就只有几条的时候，EB染色基本看不到条带，所以做一次二次pcr是必要的。...

好  谢谢
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16楼2013-12-27 17:44:13
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摩卡~~

禁虫 (著名写手)
本帖内容被屏蔽
17楼2019-07-09 02:18:44
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山舞银蛇

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

再多10~20个循环先试试。
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核酸提取与Taqman诊断
18楼2019-07-09 15:30:34
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