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tianjietian

木虫 (小有名气)

[交流] 请教:柱压太高

实验中遇到柱压太高怎么办?正在作体内实验,处理血浆样品和组织匀浆,现在柱子压力太高(快超过20MPa了),是不是柱子堵了?应该如何处理才好?用什么冲柱能冲的比较好啊?我用的是普通C18柱。大家多多发言给点建议吧!
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zhangting136


tianjietian(金币+1,VIP+0):谢谢
首先,排气,看柱压是否能降下来。如果要冲柱可用乙腈冲。另外,要考虑流动相是否超声排气充分。温度低,柱压也会相对较高,可适当升高温度。
2楼2008-01-03 14:22:12
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liangjuan2007

铜虫 (小有名气)


tianjietian(金币+1,VIP+0):xiexie
注意样品
看看是不是样品不干净
3楼2008-01-03 16:10:48
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tianjietian

木虫 (小有名气)

谢谢楼上的!排气是肯定排了的,超声15分钟呢。用乙腈冲比用甲醇冲好吗?有没有一个冲柱方法,我怀疑柱头不干净堵了。样品进样时我都是离心后才进的,不干净的话进样时就能发现了。
4楼2008-01-03 17:07:08
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zhangxuan200

铁杆木虫 (正式写手)

柱压高还是系统压力高


karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
是柱压高还是系统压力高?用预柱了吗?体内样品很脏,所以容易堵住子。应该用预柱,压力大了就换预柱或冲洗预柱。如果是系统压力大,那可能的原因很多,如自动进样针座、预柱、在线过滤器、管线等都有可能。
冲柱用含水甲醇就行,因为蛋白易溶于水,可用50:50甲醇:水
5楼2008-01-03 17:15:07
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tianjietian

木虫 (小有名气)

是柱压高,当然要用预柱了,不然柱子就污染了。一直也是用含水甲醇冲的,从10%、50%到纯甲醇
6楼2008-01-03 17:55:20
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ln_026

银虫 (正式写手)

1样品要过滤膜;2可用10%甲醇冲洗柱子一个小时左右看看行不;3如果是柱子堵了,把柱子反装,冲洗
7楼2008-01-03 18:00:41
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zhaoshi330

金虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢!
血样和组织匀浆一定要加预柱,有些物质离心是除不去的,预柱可防止堵柱子
依次用10%,50%,纯甲醇冲洗
有缺房子有缺车的有缺钱的有缺德的
8楼2008-01-03 20:56:39
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风过留痕

反装好象不行吧?
如果没有说明,是不能反装的!
9楼2008-01-04 12:10:58
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jiaban

银虫 (小有名气)

看看柱前压,再看看柱后压,也有可能是预柱堵了,换根预柱看看怎样
10楼2008-01-04 14:33:09
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