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sylgh4923

铜虫 (正式写手)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教!
生物样品中杂质较多,进样多了柱压会升高。其实柱压升高了也不要慌,首先逐段排查,确定究竟是哪部分压力大。如果是预柱堵了,就把预柱端稍微超声一下;如果是管路堵了,就用盐酸溶液(0.1M)、50%异丙醇等冲洗;如果是色谱柱堵了,最简单的办法就是把柱子的进口端的筛板取下来,用50%异丙醇超声一会就可以了。
21楼2008-04-29 14:05:13
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xiongwell

银虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
有的时候,柱子要是在流入方被堵了,反转过来冲,容易将堵住的东西冲洗出来,实际中试过,可以。有的时候,正常流向不行了,把柱子倒过来用,还很正常,但是这样的代价就是柱子可能也使用不了太长时间了。(如果柱子已经不行了,这样延长时间用用也还是不错的,节约成本嘛)
22楼2008-04-29 22:01:23
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小鱼仙草

银虫 (小有名气)

前段时间我们实验室的柱子也是出现这样的问题,反冲也没有用……楼主现在有解决问题吗?
勇敢的去追寻自己想要的!
23楼2008-05-02 01:10:34
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we-july

银虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教!
一般来说体内样品里蛋白、肽等东西多,可能楼主已经离心了,可是蛋白、肽等在有机流动相中的溶解度不好,所以进样过程中会变性析出,或者是在柱中死保留,柱压就慢慢升高了。
这样的话用大比例有机相反而会使柱压增高,还是用20%左右乙腈-水冲冲好,乙腈粘度低,对蛋白等的溶解度也还可以,洗脱强度也比甲醇大。

已经柱压高了,冲洗时间一定要长,至少1到2天。小流速慢慢冲看柱压有所降低了然后再逐步上调流速和有机相比例。

再进样时最好流动相中加点盐类,加大蛋白类物质在流动相中的溶解度。
24楼2008-05-02 08:53:46
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雨后

铜虫 (小有名气)

1.平时做生物样品后一定要用水冲柱把蛋白冲掉后再用水冲,
2.柱压已经高得不行了,如果是系统或柱子脏了,可以尝试用异丙醇低流速冲柱,
3.如果是检测器堵了,可以用5%硝酸冲系统,这时候不能接柱子,而且,柱压下来后,一定要用水把系统冲为中性再用甲醇冲。
25楼2008-07-16 11:53:15
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雨后

铜虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢!
1.平时做生物样品后一定要用水冲柱把蛋白冲掉后再用甲醇冲,
2.柱压已经高得不行了,如果是系统或柱子脏了,可以尝试用异丙醇低流速冲柱,
3.如果是检测器堵了,可以用5%硝酸冲系统,这时候不能接柱子,而且,柱压下来后,一定要用水把系统冲为中性再用甲醇冲。
26楼2008-07-16 11:56:35
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jolly8195

铁虫 (初入文坛)

分段排除的方法是很好的,试试吧
27楼2008-07-16 16:56:59
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520360y

金虫 (初入文坛)

看看单向阀时不时被盐堵主了
28楼2008-07-16 17:04:07
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lxg1983

铁虫 (初入文坛)

首先,样品一定要干净
其次,查明到底是管路还是柱子堵了
最后,冲洗或超声。
29楼2008-07-20 12:48:52
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