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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药剂学 » 请教：柱压太高
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sylgh4923

铜虫 (正式写手)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！
生物样品中杂质较多，进样多了柱压会升高。其实柱压升高了也不要慌，首先逐段排查，确定究竟是哪部分压力大。如果是预柱堵了，就把预柱端稍微超声一下；如果是管路堵了，就用盐酸溶液（0.1M）、50%异丙醇等冲洗；如果是色谱柱堵了，最简单的办法就是把柱子的进口端的筛板取下来，用50%异丙醇超声一会就可以了。
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21楼2008-04-29 14:05:13
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xiongwell

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):3Q
有的时候，柱子要是在流入方被堵了，反转过来冲，容易将堵住的东西冲洗出来，实际中试过，可以。有的时候，正常流向不行了，把柱子倒过来用，还很正常，但是这样的代价就是柱子可能也使用不了太长时间了。（如果柱子已经不行了，这样延长时间用用也还是不错的，节约成本嘛）
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22楼2008-04-29 22:01:23
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小鱼仙草

银虫 (小有名气)
前段时间我们实验室的柱子也是出现这样的问题，反冲也没有用……楼主现在有解决问题吗？
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勇敢的去追寻自己想要的！
23楼2008-05-02 01:10:34
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we-july

银虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教！
一般来说体内样品里蛋白、肽等东西多，可能楼主已经离心了，可是蛋白、肽等在有机流动相中的溶解度不好，所以进样过程中会变性析出，或者是在柱中死保留，柱压就慢慢升高了。
这样的话用大比例有机相反而会使柱压增高，还是用20％左右乙腈-水冲冲好，乙腈粘度低，对蛋白等的溶解度也还可以，洗脱强度也比甲醇大。

已经柱压高了，冲洗时间一定要长，至少1到2天。小流速慢慢冲看柱压有所降低了然后再逐步上调流速和有机相比例。

再进样时最好流动相中加点盐类，加大蛋白类物质在流动相中的溶解度。
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24楼2008-05-02 08:53:46
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雨后

铜虫 (小有名气)
1.平时做生物样品后一定要用水冲柱把蛋白冲掉后再用水冲，
2.柱压已经高得不行了，如果是系统或柱子脏了，可以尝试用异丙醇低流速冲柱，
3.如果是检测器堵了，可以用5％硝酸冲系统，这时候不能接柱子，而且，柱压下来后，一定要用水把系统冲为中性再用甲醇冲。
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25楼2008-07-16 11:53:15
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雨后

铜虫 (小有名气)
★
karl2100(金币+1,VIP+0):谢谢！
1.平时做生物样品后一定要用水冲柱把蛋白冲掉后再用甲醇冲，
2.柱压已经高得不行了，如果是系统或柱子脏了，可以尝试用异丙醇低流速冲柱，
3.如果是检测器堵了，可以用5％硝酸冲系统，这时候不能接柱子，而且，柱压下来后，一定要用水把系统冲为中性再用甲醇冲。
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26楼2008-07-16 11:56:35
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jolly8195

铁虫 (初入文坛)
分段排除的方法是很好的，试试吧
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27楼2008-07-16 16:56:59
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520360y

金虫 (初入文坛)
看看单向阀时不时被盐堵主了
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28楼2008-07-16 17:04:07
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lxg1983

铁虫 (初入文坛)
首先，样品一定要干净
其次，查明到底是管路还是柱子堵了
最后，冲洗或超声。
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29楼2008-07-20 12:48:52
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