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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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tianjietian

木虫 (小有名气)

[交流] 请教:柱压太高

实验中遇到柱压太高怎么办?正在作体内实验,处理血浆样品和组织匀浆,现在柱子压力太高(快超过20MPa了),是不是柱子堵了?应该如何处理才好?用什么冲柱能冲的比较好啊?我用的是普通C18柱。大家多多发言给点建议吧!
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we-july

银虫 (小有名气)


karl2100(金币+1,VIP+0):多谢指教!
一般来说体内样品里蛋白、肽等东西多,可能楼主已经离心了,可是蛋白、肽等在有机流动相中的溶解度不好,所以进样过程中会变性析出,或者是在柱中死保留,柱压就慢慢升高了。
这样的话用大比例有机相反而会使柱压增高,还是用20%左右乙腈-水冲冲好,乙腈粘度低,对蛋白等的溶解度也还可以,洗脱强度也比甲醇大。

已经柱压高了,冲洗时间一定要长,至少1到2天。小流速慢慢冲看柱压有所降低了然后再逐步上调流速和有机相比例。

再进样时最好流动相中加点盐类,加大蛋白类物质在流动相中的溶解度。
24楼2008-05-02 08:53:46
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zhangting136


tianjietian(金币+1,VIP+0):谢谢
首先,排气,看柱压是否能降下来。如果要冲柱可用乙腈冲。另外,要考虑流动相是否超声排气充分。温度低,柱压也会相对较高,可适当升高温度。
2楼2008-01-03 14:22:12
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liangjuan2007

铜虫 (小有名气)


tianjietian(金币+1,VIP+0):xiexie
注意样品
看看是不是样品不干净
3楼2008-01-03 16:10:48
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tianjietian

木虫 (小有名气)

谢谢楼上的!排气是肯定排了的,超声15分钟呢。用乙腈冲比用甲醇冲好吗?有没有一个冲柱方法,我怀疑柱头不干净堵了。样品进样时我都是离心后才进的,不干净的话进样时就能发现了。
4楼2008-01-03 17:07:08
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