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jsxzzxj

铜虫 (初入文坛)

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专业: 临床微生物学检验

[求助] 细菌质粒提取浓度太低求助已有8人参与

我质粒提取已经好几次啦，每次提取出来浓度都是很低，我这是低拷贝质粒，想提取出质粒做转化实验，求大侠指导一下并帮我分析一下为什么我提取的质粒跑电泳结果显示浓度太低？
我曾经加大过菌量可是结果却提不出来，我的操作步骤都是严格按照天根小量中提试剂盒的说明书上来的，求高人指导下奥。

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1楼 2013-12-23 15:01:39

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yudaoqian88

至尊木虫 (知名作家)

不良人

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专业: 作物种质资源与遗传育种学

引用回帖:

24楼: Originally posted by 艰苦温度 at 2014-01-16 10:30:54
最后检测浓度的时候，230的峰突出了，是什么原因你了解吗？怎么才能解决这个问题呢？求赐教。我提了好多次，可是一直有这个问题，不知道什么原因。。。...

230峰值高表明溶液内盐离子浓度较大！
如果使用试剂盒提取的话，建议漂洗的时候适当加大离心力，漂洗两遍后要按照说明再空离心几分钟，可有效降低离子浓度。洗脱可以用自己的双蒸水，也可以启到效果！
如果是自己配置的试剂提取的，沉淀下来的产物需要用70-75%酒精漂洗，目的也是去除盐离子等杂质，然后离心沉淀，然后吸去多余酒精，风干后用超纯水溶解就是了！