【答案】应助回帖

为什么我木有红花？

11楼2014-01-01 22:06:11

xqxqxhxh1

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【答案】应助回帖

既然没有污染，说明表面灭菌彻底，又没有浸泡，升汞进入内部组织的可能性也小,看来是没有内生菌，别做了，浪费时间。当然这只是我个人的看法，因为我没有做过白芨的内生菌,所以您还是要同您的老师商量才行。

自己啥都不懂

12楼2014-01-02 00:47:47

发酵流程卡

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【答案】应助回帖

对于内生菌的分离，看能否按以下的方式做：
1），表面消毒可用10%的次氯酸钠消毒10min后，用无菌水清洗多次，取最后一次的清洗液测OD600，以无菌水作参比，OD600的值小于0.01（以实验条件而定，若实验条件允许，OD600越小越好），则说明表面微生物已清除。然后加入无菌水用研磨器研磨白芨根部，取研磨液用无菌水梯度稀释，分别接种培养，剩余研磨液冷藏。。。。。

做最真实的自己

13楼2015-07-10 09:00:08

izzi

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引用回帖:

2楼: Originally posted by xqxqxhxh1 at 2013-12-22 07:41:52
建议有以下几个:
1. 请在你的1000mLPDA的配方中加入KH2PO4 3g; MgSO4 1.5g; 维生素B1: 10mg后再试试。因为PDA配方有两种，一种是综合性的，一种是普通的(主要成分就是马铃薯和葡萄糖)。综合性配方还是我上大学时 ...

你好，请问，我在许多本科毕业论文和中文文献上看到的分离植物内生真菌的方法，消毒时都是采用75%酒精和2%(或5%）次氯酸钠分别浸泡的，并且能够分离到内生真菌，但您提到不要浸泡酒精，是您试过浸泡会把内生真菌杀死吗？

14楼2016-07-04 10:07:57

陆封肆闭

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【答案】应助回帖

1.取到白芨根后，自然晾干，用干纱布将表面擦净，不要用酒精、升汞，次氯酸钠这些溶液浸泡消毒，会渗进去杀死内生菌的。
2.分离时，手术刀火焰灭菌后从根表面一层一层地削，每削一刀都火焰灭菌一下，直到削到里面"干净"的部分，切取一小块，接入PDA上。
3.纯化。如果培养出现细菌、酵母、或多个真菌菌落，则需进行多次纯化，获得纯菌株，最后镜检确认一下。
这其实就是一个考验手法的操作，多做几次就行。食药用菌工作者经常对金针菇、北虫草、野生菌、菇木进行分离，难度也不小，熟能生巧，多做几次就出来了，技术都是练出来的。祝你好运！

15楼2016-07-04 18:59:26

tazhongren

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【答案】应助回帖

消毒时间太长了，次氯酸钠3分钟以内，升汞1分半以内就够了，你这个时间都杀死了

16楼2016-07-06 00:13:17

有点小陶醉

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我试了0.1%升汞消毒1分钟的，没有菌长出来

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17楼2016-08-25 23:42:37

wangxiaoguo

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首先要确定你所拿的材料是否有内生菌，并不是所有的根都有，如果是人工栽培的，那么很少能分离出来内生菌。

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202010

18楼2016-08-26 09:52:03

wangxiaoguo

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第二消毒时间什么的都没有问题，处理时间的长短只会影响你分离到菌的多少，除非处理时间太长什么也就长不出来。可以用1/2培养基试一下，c源用葡萄糖适当加一点蔗糖。分离培养基不要加抗生素。不过我个人认为你分离不出来的主要原因是你选择的根的材料，最好做个根的染色，看看你的材料里面是否有内生菌。

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202010

19楼2016-08-26 09:56:37