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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » [求助]HPLC又开始犯病了！
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hongyan0606

捐助贵宾 (正式写手)

[交流] [求助]HPLC又开始犯病了！

请各位大侠帮帮忙啊！不知怎么的，今天进的样出来的峰全是圆头圆脑的，峰很宽，我是减小了进样量、提高柱温、提高流速、检查了所有的接头，这些都试了，没有任何改变！快疯啦！请问这个能是什么原因呢？

[ Last edited by 佳怡 on 2009-4-23 at 21:50 ]
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1楼 2008-01-02 14:39:43
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happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜
★
yensh(金币+1,VIP+0):谢谢应助，欢迎常来分析版
检查下是不是进样器堵了，还有检测器！然后换个柱子柱子看下！不知道你用的什么检测器，如果DAD的，等能量是不是有变化呢？
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我为新生
2楼2008-01-02 16:18:17
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psyhit

银虫 (小有名气)
★
yensh(金币+1,VIP+0):谢谢应助~~~
我经常用液相，对色谱比较了解的。估计有两种可能性：1 可能是柱子的问题，可能是柱子的分离效能下降，你可以试着换个新的柱子，证实是柱子的毛病，你就可以把柱子倒过来接，可以再用一段时间；2 可能是你的流动相中pH值对测定有影响，如果没有换样品就不是这个问题。
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3楼2008-01-02 21:00:46
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hongyan0606

捐助贵宾 (正式写手)
流动相的PH没有问题，我是因为另一根柱子问题更大才用的这根柱子。这根效果比另一个好多了，但还不是很好，不知道是怎么了！郁闷阿！我用的紫外监测器，自动进样！谢谢大家
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4楼2008-01-03 11:41:02
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happy169

木虫 (著名写手)

冰王子蜜
自动进样器进样针的压力多少?我还是觉得系统堵塞的可能性比较大,不知道你以前做样品也是这样的方法吗?能不能换个方法试试看呢?我说的检测器的等能量都看了吗?没有问题吗?那流通池是不是有污染啊 ?
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我为新生
5楼2008-01-03 11:59:59
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tntdianfeng

银虫 (小有名气)
建议更换色谱柱。

应该是色谱柱污染，或者已到寿命。另外，样品拖尾严重么？如果是的话，可能是色谱柱与样品之间作用力太强，这个就需要调整流动相或者更换其它固定相的色谱柱。
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6楼2008-01-03 12:52:24
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hongyan0606

捐助贵宾 (正式写手)
没有脱尾！又换了一根一样的柱子，竟然一个峰分成两个了！
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7楼2008-01-03 12:56:48
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葛思思

银虫 (小有名气)
是不是流动相不匹配？
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8楼2008-01-03 16:14:42
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ady

金虫 (正式写手)
应该是换柱时，柱接头留下了太大空间，死体积过大造成的。还有一种可能就是检测池中留有气泡。
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9楼2008-01-03 17:30:57
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yangyuheng

金虫 (小有名气)
可以稍微改变以下流动相的极性
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10楼2008-01-03 21:37:06
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