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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » ELISA空白值在0.05-0.08正常吗？
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守望海贝

捐助贵宾 (小有名气)

[求助] ELISA空白值在0.05-0.08正常吗？ 已有2人参与

我最近在做硕士论文，建立elisa方法，但是我的阳性值可以达到1.35，阴性为0.15，空白值虽然小于0.1，但是值高的时候可以达到0.08，且会随着我的抗原包被浓度增加而增加，我试过一抗稀释液用PBST，二抗稀释液中加入1%BSA，但是直接降低了特异性结合，阳性值都降到0.03了，请问还有什么措施可以不大程度地影响阳性和阴性的值，而降低空白值吗？另外，空白值会随着抗原包被浓度增加而增加，说明了什么？
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1楼 2013-12-20 13:03:30
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piaofei123

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

（1）会不会是二抗的浓度偏高了点，降低点试下；
（2）二抗里面加点表面活性剂，如吐温-20；
（3）包被的过程中，调整下封闭液的配方。
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5楼2014-08-07 15:54:43
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守望海贝

捐助贵宾 (小有名气)
谢谢，可是没有具体的解决措施啊，里面提到的我都试过了
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2楼2013-12-21 16:12:55
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2013-12-23 14:54:42
空白0.08很好啊，阴性0.15有点高！理论上阴性跟空白值应该差不多，空白值会随着抗原包被浓度增加而增加这个很正常，所以一般才会有最优的抗原浓度！
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3楼2013-12-23 10:52:56
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守望海贝

捐助贵宾 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by 原罪的祷告 at 2013-12-23 10:52:56
空白0.08很好啊，阴性0.15有点高！理论上阴性跟空白值应该差不多，空白值会随着抗原包被浓度增加而增加这个很正常，所以一般才会有最优的抗原浓度！

谢谢，我们实验室师兄做的另一个蛋白，空白值在0.03，阴性值和我的差不多，所以我就觉得自己的空白值太高了
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4楼2013-12-23 17:04:45
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