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金虫 (正式写手)

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[交流] western boltting技术求救

目前，本人正在做一个目标基因在各个发育时期和某一时期各个组织中的表达情况分析

在DNA水平，做TR-PCR验证在各个组织以及不同的发育时期均表达，但是做western blotting分析时，总没有目标带出来，用同样的抗体对纯化蛋白进行western blotting分析能出来目标带，不知道大家有没有遇到这样的问题？是怎么解决的呢？

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1楼 2013-12-19 23:05:12

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金虫 (正式写手)

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引用回帖:

13楼: Originally posted by lidonghong at 2013-12-20 11:48:23
做western blotting分析时，总没有目标带出来的时候，你有没有做纯化蛋白的一个阳性对照，如果做了且有阳性对照有条带，那就说明是你蛋白的问题，这样的原因大多可能是提取的问题（总蛋白浓度如何），也有可能你这个 ...

做了阳性对照，有条带出来我们也考虑是目标蛋白丰度的问题，请问有什么方法可以改进呢？