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HRP催化底物,请问只有H2O2,没有底物?
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xiaoyuehua
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HRP催化底物,请问只有H2O2,没有底物?
HRP催化底物,请问只有H2O2,没有底物时,HRP能分解H2O2吗?
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2013-12-17 11:21:59
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2014-01-27 19:52:56
HRP是双底物,除双氧水外其他底物很多,west常用的是鲁米诺,测活用的愈创木酚,Vc等等。一般都是显色法或荧光法。分解双氧水的是过氧化氢酶。以双氧水为氧化剂的是过氧化物酶。
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3楼
2013-12-17 14:40:49
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4楼
:
Originally posted by
xiaoyuehua
at 2013-12-17 14:56:13
那么请问HRP能否分解双氧水呢?...
说不好,推测在没有底物的情况下,单纯加双氧水和HRP,HRP可能会被氧化而催化中心分解最终失活,而这一过程中双氧水含量下降。至于是否有过氧化氢酶活性不好说,得查文献。
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5楼
2013-12-17 15:51:02
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6楼
:
Originally posted by
cicelyzh
at 2013-12-18 12:08:47
鲁米诺在氧的作用下发出荧光,用于western信号检测,与HRP没有关系,其它酶,只要能够产生氧的,都可以让鲁米诺发荧光。至于HRP的作用是催化双氧水产生氧,所以HRP的底物是双氧水。...
按你的说法,鲁米诺发光不应加双氧水,也不需要HRP标的二抗,因为空气中的氧气同样会使鲁米诺发光。HRP是辣根过氧化物酶,不是过氧化氢酶,是以双氧水底物催化氧化反应的。而直接分解双氧水的是过氧化氢酶(catalase)。
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7楼
2013-12-18 19:38:53
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