24小时热门版块排行榜    

查看: 1737  |  回复: 17

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by lpzl at 2013-12-18 21:15:30
嗯,差不多吧。。。我是用尿素溶解的,一般4度过夜。然后过镍柱纯化,先用10mM咪唑平衡,后直接用500mM咪唑洗脱,经SDS电泳发现了我的目的带。...

你说的用10mM的咪唑平衡时什么意思啊?
严以律已,宽以待人
11楼2013-12-18 21:33:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by lpzl at 2013-12-18 21:15:30
嗯,差不多吧。。。我是用尿素溶解的,一般4度过夜。然后过镍柱纯化,先用10mM咪唑平衡,后直接用500mM咪唑洗脱,经SDS电泳发现了我的目的带。...

你用的是多大pH的缓冲液配的咪唑啊?每次洗脱的时候用多少微升咪唑洗脱啊?
严以律已,宽以待人
12楼2013-12-18 21:34:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lpzl

木虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 21:33:07
你说的用10mM的咪唑平衡时什么意思啊?...

就是用来平衡柱子的。。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
13楼2013-12-19 08:31:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
12楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 21:34:50
你用的是多大pH的缓冲液配的咪唑啊?每次洗脱的时候用多少微升咪唑洗脱啊?...

PH=8.0的,每次都用10ml洗脱液洗脱
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
14楼2013-12-19 08:32:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 20:19:40
你好,用盐酸胍溶解包涵体一定能使His标签暴露出来吗?这次我用尿素过夜溶解包涵体,没有挂柱。还有就是用多大pH的缓冲液配咪唑比较好啊?咪唑的浓度最低能降到多少啊?第一次做不懂啊,请多指点...

pH一般都是8.0左右,咪唑浓度没有最低要求,能洗下你的目的条带就行
15楼2013-12-19 09:29:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 20:19:40
你好,用盐酸胍溶解包涵体一定能使His标签暴露出来吗?这次我用尿素过夜溶解包涵体,没有挂柱。还有就是用多大pH的缓冲液配咪唑比较好啊?咪唑的浓度最低能降到多少啊?第一次做不懂啊,请多指点...

pH一般都是8.0左右,咪唑浓度没有最低要求,能洗下你的目的条带就行
16楼2013-12-19 09:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 17:47:14
是新的,用的 Ni-NTA His-Bind Resin...

可以试试再生一下柱子
17楼2013-12-19 09:30:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by zilinweizhu at 2013-12-19 09:30:54
可以试试再生一下柱子...

怎么再生柱子啊?新的也需要再生吗?
严以律已,宽以待人
18楼2013-12-19 11:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 海之韵-哈哈 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 人气不行了 +6 fansofjerry 2026-08-21 6/300 2026-08-21 13:47 by 撸猫猫
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +15 医学老男孩 2026-08-20 18/900 2026-08-21 13:46 by 医学老男孩
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +7 angus9576 2026-08-17 12/600 2026-08-21 13:38 by weiyin
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +23 yaoyewhu2008 2026-08-20 25/1250 2026-08-21 12:19 by Poppy1104
[基金申请] 什么时候开奖? +7 CrisMessi 2026-08-18 7/350 2026-08-21 12:15 by weiyin
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 18/900 2026-08-21 11:53 by wuchongjun
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +15 kkkl_v 2026-08-19 16/800 2026-08-21 11:22 by 365372687
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧? +4 哈哈蛤? 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 时间戳今天,20号变了 +4 archvillain 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:10 by gatelove
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 2027广东省杰青 +4 奶牛小黑 2026-08-15 10/500 2026-08-19 11:02 by wanfengnew
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
信息提示
请填处理意见