24小时热门版块排行榜    

查看: 1476  |  回复: 17

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by lpzl at 2013-12-18 21:15:30
嗯,差不多吧。。。我是用尿素溶解的,一般4度过夜。然后过镍柱纯化,先用10mM咪唑平衡,后直接用500mM咪唑洗脱,经SDS电泳发现了我的目的带。...

你说的用10mM的咪唑平衡时什么意思啊?
严以律已,宽以待人
11楼2013-12-18 21:33:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

引用回帖:
10楼: Originally posted by lpzl at 2013-12-18 21:15:30
嗯,差不多吧。。。我是用尿素溶解的,一般4度过夜。然后过镍柱纯化,先用10mM咪唑平衡,后直接用500mM咪唑洗脱,经SDS电泳发现了我的目的带。...

你用的是多大pH的缓冲液配的咪唑啊?每次洗脱的时候用多少微升咪唑洗脱啊?
严以律已,宽以待人
12楼2013-12-18 21:34:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lpzl

木虫 (正式写手)

引用回帖:
11楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 21:33:07
你说的用10mM的咪唑平衡时什么意思啊?...

就是用来平衡柱子的。。。。
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
13楼2013-12-19 08:31:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lpzl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
引用回帖:
12楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 21:34:50
你用的是多大pH的缓冲液配的咪唑啊?每次洗脱的时候用多少微升咪唑洗脱啊?...

PH=8.0的,每次都用10ml洗脱液洗脱
Start_everyday_with_a_new_hope,_leave_bad_memories...
14楼2013-12-19 08:32:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 20:19:40
你好,用盐酸胍溶解包涵体一定能使His标签暴露出来吗?这次我用尿素过夜溶解包涵体,没有挂柱。还有就是用多大pH的缓冲液配咪唑比较好啊?咪唑的浓度最低能降到多少啊?第一次做不懂啊,请多指点...

pH一般都是8.0左右,咪唑浓度没有最低要求,能洗下你的目的条带就行
15楼2013-12-19 09:29:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
9楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 20:19:40
你好,用盐酸胍溶解包涵体一定能使His标签暴露出来吗?这次我用尿素过夜溶解包涵体,没有挂柱。还有就是用多大pH的缓冲液配咪唑比较好啊?咪唑的浓度最低能降到多少啊?第一次做不懂啊,请多指点...

pH一般都是8.0左右,咪唑浓度没有最低要求,能洗下你的目的条带就行
16楼2013-12-19 09:30:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 海之韵-哈哈 at 2013-12-18 17:47:14
是新的,用的 Ni-NTA His-Bind Resin...

可以试试再生一下柱子
17楼2013-12-19 09:30:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

海之韵-哈哈

银虫 (小有名气)

引用回帖:
17楼: Originally posted by zilinweizhu at 2013-12-19 09:30:54
可以试试再生一下柱子...

怎么再生柱子啊?新的也需要再生吗?
严以律已,宽以待人
18楼2013-12-19 11:21:00
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 海之韵-哈哈 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 307求调剂 +3 wyyyqx 2026-03-01 3/150 2026-03-01 14:42 by ms629
[考研] 298求调剂 +9 人间唯你是清欢 2026-02-28 12/600 2026-03-01 14:23 by Ducount.Y
[考研] 材料284求调剂,一志愿郑州大学英一数二专硕 +10 想上岸的土拨鼠 2026-02-28 10/500 2026-03-01 14:12 by yc258
[考研] 290求调剂 +8 材料专硕调剂; 2026-02-28 9/450 2026-03-01 12:46 by 闭眼看蓝天
[考研] 0856材料专业298分有科研经历 硕士研究生调剂自荐信 +6 zyf上岸 2026-03-01 6/300 2026-03-01 12:43 by liqiongjy
[考研] 321求调剂一志愿东北林业大学材料与化工英二数二 +3 虫虫虫虫虫7 2026-03-01 6/300 2026-03-01 11:50 by gaoxiaoniuma
[考研] 材料类求调剂 +8 wana_kiko 2026-02-28 8/400 2026-03-01 11:44 by 王伟要上岸啊
[考研] 317一志愿华南理工电气工程求调剂 +6 Soliloquy_Q 2026-02-28 11/550 2026-03-01 11:14 by 歌liekkas
[考研] 298求调剂 +5 axyz3 2026-02-28 5/250 2026-03-01 06:45 by 刘兵
[考研] 285求调剂 +6 满头大汗的学生 2026-02-28 6/300 2026-03-01 06:29 by Trying]
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[基金申请] 面上模板改不了页边距吧? +5 ieewxg 2026-02-25 6/300 2026-03-01 00:10 by addressing
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 化工专硕348,一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考博] 26申博 +4 想申博! 2026-02-26 4/200 2026-02-28 21:37 by limorning
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[高分子] 求环氧树脂研发1名 +3 孙xc 2026-02-25 11/550 2026-02-28 16:57 by ichall
[考研] 0856调剂 +3 刘梦微 2026-02-28 3/150 2026-02-28 13:22 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
请填处理意见