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转基因猴子

木虫 (正式写手)

应助: 15 (小学生)
金币: 3791.5
散金: 29
红花: 4
帖子: 784
在线: 277.7小时
虫号: 450786
注册: 2007-11-04
性别: GG
专业: 生物化学

[求助] GENE-PUC57重组质粒转化生成蓝色菌落，为什么？已有1人参与

各位虫子
本人合成了一段基因，公司已经帮我合成好并插入到PUC57质粒中了
本科生练习做转化时使用了我的gene-PUC57质粒，最后涂布加上了IPTG和X-Gal，最后长出来的全是蓝色菌落。这是为什么？我做酶切一切正常，能切除两条带，而虽然PUC57中含有lacZ，但是已经插入我的目的片段了为什么还会形成蓝色菌落
求教

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【求助/交流】重组质粒转化已经有22人回复

我还年轻，我要上路！

1楼 2013-12-14 10:25:18

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

zilinweizhu

银虫 (小有名气)

应助: 32 (小学生)
金币: 39.1
红花: 1
帖子: 109
在线: 41.2小时
虫号: 2825867
注册: 2013-11-25
性别: GG
专业: 微生物生理与生物化学

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-15 21:58:56
转基因猴子: 金币+5, ★★★很有帮助, 我试试 2013-12-16 10:31:14

这种情况是有的，原因可能有：1、档插入片段小时，重组子有形成蓝斑的情况。2、插入片段太短，并且刚好和lacZ使用同一个读码框，造成半乳糖苷酶具有部分活性。3、插入片段没有阻断操纵子，造成通读，质粒编码合成了a肽链，使半乳糖苷酶具有活性。根据您的情况，可能要考虑是否为后面两种，重新选择合适质粒

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