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love_糖糖

金虫 (正式写手)

[求助] 真菌DNA提取 已有3人参与

我用液氮研磨法提取曲霉DNA提了几次都没提出来,个人认为应该不难啊,不知道哪个步骤操作不当?我用的是天根的植物试剂盒,液体培养的,按照操作步骤一次也没成功,跑电泳根本就看不到带,各位大侠有什么好的建议么?跪谢了先。。。
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mengtaji

木虫 (小有名气)

一般液体培养,再加上试剂盒提取是没有问题的,
1. 这条可能说的有点多余,,试剂盒里面是不是有需要添加的东西,有没有按量添加
2. 菌丝体过滤出来以后要用无菌水冲洗一下然后滤纸把水分吸干,水分吸干了再加入液氮才可以研磨充分,一定要研磨充分
3. 个人认为,提DNA的时候不要加入太多菌丝体进去,可能会裂解不完全,

祝好运
天道酬勤
22楼2013-12-18 21:38:07
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原罪的祷告

金虫 (正式写手)

慧耘生物


【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
love_糖糖: 金币+1, 有帮助 2013-12-14 20:43:53
霉菌的话通常是平板上培养吧,取菌的丝状体或子实体提取,一般酵母才直接液体提!
2楼2013-12-13 12:33:23
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肥猫p

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
love_糖糖: 金币+2, 有帮助 2013-12-14 20:43:07
国产试剂盒效果一般都不怎么好。所以你得先加液氮研磨成菌粉再使用试剂盒提基因组。国外有比较好的试剂盒,从平板上挂下菌丝就能直接提取,但是好贵,50次2k多
3楼2013-12-13 13:31:18
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love_糖糖

金虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 肥猫p at 2013-12-13 13:31:18
国产试剂盒效果一般都不怎么好。所以你得先加液氮研磨成菌粉再使用试剂盒提基因组。国外有比较好的试剂盒,从平板上挂下菌丝就能直接提取,但是好贵,50次2k多

国外的试剂盒我就不指望了,老板不乐意给买。只是不明白为什么一点都提不出来,真是急死了。
4楼2013-12-13 14:59:59
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