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真菌DNA提取 已有3人参与
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| 我用液氮研磨法提取曲霉DNA提了几次都没提出来，个人认为应该不难啊，不知道哪个步骤操作不当？我用的是天根的植物试剂盒，液体培养的，按照操作步骤一次也没成功，跑电泳根本就看不到带，各位大侠有什么好的建议么？跪谢了先。。。 |
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我是按照试剂盒的操作步骤来的，大体是这样： 1．取菌丝体放进研钵加入液氮充分碾磨。 2．将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700 μl 65℃预热缓冲液GP1的离心管中（实验前巯基乙醇，使其终浓度为0.1%），迅速颠倒混匀65℃水浴20 min。 3．加入700 μl氯仿，充分混匀， 离心5 min。 4．将上层水相转入一个新的离心管中，加入700 μl缓冲液GP2，充分混 匀。 5．将混匀的液体转入吸附柱CB3中，离心30 sec，弃掉废液。 6．向吸附柱CB3中加入500 μl缓冲液GD离心30 sec，倒掉废液。 7．向吸附柱CB3中 加入600 μl 漂洗液PW离心30 sec，倒掉废液 8．重复操作步骤7. 9．将吸附柱CB3放回收集管中，离心2 min，倒掉废液。将吸附柱 CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。 10.将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，离心2 min，将溶液收集到离心管中。 |
12楼2013-12-17 19:23:40
2楼2013-12-13 12:33:23
肥猫p
木虫 (正式写手)
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3楼2013-12-13 13:31:18
4楼2013-12-13 14:59:59
