24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

love_糖糖

金虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 547.7
散金: 22
红花: 11
帖子: 301
在线: 163.6小时
虫号: 1424505
注册: 2011-10-01
性别: MM
专业: 药物化学

[求助] 真菌DNA提取已有3人参与

我用液氮研磨法提取曲霉DNA提了几次都没提出来，个人认为应该不难啊，不知道哪个步骤操作不当？我用的是天根的植物试剂盒，液体培养的，按照操作步骤一次也没成功，跑电泳根本就看不到带，各位大侠有什么好的建议么？跪谢了先。。。

回复此楼

» 猜你喜欢

基金委咋了？2026年的指南还没有出来？已经有4人回复
纳米粒子粒径的测量已经有8人回复
疑惑？已经有5人回复
国自然申请面上模板最新2026版出了吗？已经有14人回复
计算机、0854电子信息（085401-058412）调剂已经有5人回复
Materials Today Chemistry审稿周期已经有5人回复
溴的反应液脱色已经有7人回复
推荐一本书已经有12人回复
基金申报已经有4人回复
常年博士招收(双一流，工科) 已经有4人回复

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

1楼 2013-12-13 11:46:25

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

love_糖糖

金虫 (正式写手)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 547.7
散金: 22
红花: 11
帖子: 301
在线: 163.6小时
虫号: 1424505
注册: 2011-10-01
性别: MM
专业: 药物化学

引用回帖:

11楼: Originally posted by 1095314666 at 2013-12-17 15:34:44
个人认为清洗和研磨比较大，你可以把你的详细操作过程说一下，我们共同探讨一下。...

我是按照试剂盒的操作步骤来的，大体是这样：
1．取菌丝体放进研钵加入液氮充分碾磨。
2．将研磨好的粉末迅速转移到预先装有700 μl 65℃预热缓冲液GP1的离心管中（实验前巯基乙醇，使其终浓度为0.1%），迅速颠倒混匀65℃水浴20 min。
3．加入700 μl氯仿，充分混匀，离心5 min。
4．将上层水相转入一个新的离心管中，加入700 μl缓冲液GP2，充分混
匀。
5．将混匀的液体转入吸附柱CB3中，离心30 sec，弃掉废液。
6．向吸附柱CB3中加入500 μl缓冲液GD离心30 sec，倒掉废液。
7．向吸附柱CB3中加入600 μl 漂洗液PW离心30 sec，倒掉废液
8．重复操作步骤7.
9．将吸附柱CB3放回收集管中，离心2 min，倒掉废液。将吸附柱
CB3置于室温放置数分钟，以彻底晾干吸附材料中残余的漂洗液。
10.将吸附柱CB3转入一个干净的离心管中，向吸附膜的中间部位悬空滴加50-200 μl洗脱缓冲液TE，室温放置2-5 min，离心2 min，将溶液收集到离心管中。