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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 酶切求助
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bunntly

木虫 (正式写手)

[求助] 酶切求助 已有2人参与

酶切图谱怪异求助。详细见附件 谢谢
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  • 附件 1 : 新建_Microsoft_Word_文档.doc
    • 2013-12-13 10:27:20, 28.5 K

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1楼 2013-12-13 10:27:33
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰手有余香，分子生物期待你更多精彩。 2013-12-13 16:10:29
图最好直接发上来，看了你的附件，不知道你说的什么地方怪异，至少交代下你的实验背景
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学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
2楼2013-12-13 15:21:12
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bunntly

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by gyesang at 2013-12-13 15:21:12
图最好直接发上来，看了你的附件，不知道你说的什么地方怪异，至少交代下你的实验背景

就是我构造的质粒进行单双酶切验证，载体本身的大小是3854bp，目的片段大小是1071bp，单双酶切均有大小相符的条带但是还是在这之间还有几条杂带。
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3楼2013-12-13 16:07:08
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dulei

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-13 16:45:15
bunntly: 金币+8, ★★★很有帮助 2013-12-14 09:56:11
酶切时间太长了，32个小时都有可能对产物造成讲解了。宝生物的酶切2个小时就可以，像是EcoRI、BamHI这样的酶2个小时足够了。切的时间长了可能出现星活性，也就是可能对非特异序列进行识别和切割，极有可能出现图中的条带。还有就是你要确定宿主菌只有这一个质粒，这样提出来的质粒正常酶切才不会有其它杂条带。
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4楼2013-12-13 16:42:18
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