应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 这样的跑胶结果让我很崩溃
202/2返回列表上一页12
查看: 4542  |  回复: 19
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

wangbo2012

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你的胶没倒好，MARK都没跑好，还有就是上样量大了，调整减小上样量
赞一下 回复此楼
11楼2013-12-14 08:57:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KEVIN_LOVE

木虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by dororo150 at 2013-12-14 01:13:24
你这明显感觉没跑开啊    你才跑了多久电泳就停了   多跑会儿   mark最快的快要跑到头了再停电泳仪

可是跑的时间短也应该会有目的条带吧，怎么这一点也没有啊
赞一下 回复此楼
12楼2013-12-14 10:11:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KEVIN_LOVE

木虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by jiaqing2 at 2013-12-14 06:32:20
要不是引物特异性不好，要不是模板加多了，建议把模板稀释10倍或者100倍再试试

100微升加了2微升的模板，不算多吧
赞一下 回复此楼
13楼2013-12-14 10:12:13
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mouhaobin

铁杆木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by KEVIN_LOVE at 2013-12-13 21:57:16
我用的是1的胶，100毫升加1克琼脂糖，微波炉里加热5分子，然后加10微升Dured，再加热2分钟，倒胶，凝固20多分钟，之后跑胶。每次我摸着都凝固了啊...

煮沸了有没有摇匀？胶不均匀，对电泳的影响很大的。煮沸了要拿出来摇几下，这样反复3次。用DuRed是没有问题的，所以你这个现象可以排除核酸染料的问题。还有跑胶的电压也很重要的
赞一下(1人) 回复此楼
14楼2013-12-14 13:27:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qapollo

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
14楼: Originally posted by mouhaobin at 2013-12-14 13:27:20
煮沸了有没有摇匀？胶不均匀，对电泳的影响很大的。煮沸了要拿出来摇几下，这样反复3次。用DuRed是没有问题的，所以你这个现象可以排除核酸染料的问题。还有跑胶的电压也很重要的...

同意，琼脂糖胶的凝结肯定没有问题，关键是你是不是完全融开。每次融胶的时候分几次加热至沸腾，直到没有明显的颗粒物为止。染料在融开之后加，摸着不烫手的时候加进去就行，摇匀再到。凝胶不能着急，完全凝结再上样电泳。
赞一下 回复此楼
15楼2013-12-14 13:44:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

alicelchf

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
首先，你的pcr结果就不positive，confirm一下自己的浓度，其次marker跑不好是因为你的gel配置有问题，你先确认下你的浓度和溶胶之后加染料时间
good luck
赞一下 回复此楼
修身、齐家、治国、平天下
16楼2013-12-14 20:53:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

KEVIN_LOVE

木虫 (正式写手)
引用回帖:
16楼: Originally posted by alicelchf at 2013-12-14 20:53:40
首先，你的pcr结果就不positive，confirm一下自己的浓度，其次marker跑不好是因为你的gel配置有问题，你先确认下你的浓度和溶胶之后加染料时间
good luck

1%的浓度，我是先溶5分钟后就加入染料，然后再溶大约两分钟
赞一下 回复此楼
17楼2013-12-14 22:22:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Dr.G

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
KEVIN_LOVE: 金币+1, ★有帮助 2013-12-15 23:45:14
1.Marker 用的是100bp Ladder的话，建议胶浓度用2%，否则跑不开；
2.增加退火温度或减少循环数，可以减少非特异性扩增；
3.模板浓度可能太高，如楼上，增加稀释倍数试一试；
4.降低延伸时间，也可以减少非特异性扩增（看看你使用的聚合酶的说明书，不同牌子的酶对退火温度、延伸时间等要求不同）
赞一下 回复此楼
18楼2013-12-15 21:33:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wqqqd2008

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
估计是核酸染料的问题，你可以换一下染料试试，比如说EB
赞一下 回复此楼
19楼2013-12-15 21:58:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jsxzzxj

铜虫 (初入文坛)
一看你的孔就是没有完全凝固就拔梳子，你可以放4摄氏度冰箱里效果非常好，五六分钟就行，自己感觉下，再一个上样量多少也很重要，我跑电泳上3ul和5ul就会差距很大，5ul拖尾比较严重，你可以弄一块胶，上样量递减一下看看哪个效果好
赞一下(1人) 回复此楼
20楼2013-12-16 09:34:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 KEVIN_LOVE 的主题更新
202/2返回列表上一页12
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 0860004 求调剂 309分 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 14:06 by ditto77778
[考研] 材料专硕初试分332一志愿西北工业大学， +4 故人?? 2026-04-09 4/200 2026-04-09 13:39 by laoshidan
[考研] 化学调剂求助 +14 LULONG1 2026-04-03 19/950 2026-04-09 10:43 by chenxi233
[考研] 283电子信息求调剂 +4 三石WL 2026-04-08 4/200 2026-04-09 10:21 by wp06
[考研] 一志愿鲁东大学071000生物学学硕初试分数276求调剂 +3 慕绝cc 2026-04-09 3/150 2026-04-09 09:57 by liuhuiying09
[考研] 277求调剂 +16 倪建设 2026-04-06 16/800 2026-04-08 21:28 by zhouxiaoyu
[考研] 324求调剂 +17 想上学求调 2026-04-03 17/850 2026-04-08 20:04 by 我减肥1
[考研] 275求调剂 +4 1624447980 2026-04-08 5/250 2026-04-08 15:29 by 哦哦123
[考研] 283求调剂 +19 A child 2026-04-04 19/950 2026-04-08 14:26 by xingguangj
[考研] 电子信息346 +4 zuoshaodian 2026-04-08 4/200 2026-04-08 11:54 by zzucheup
[考研] 281求调剂 +10 椰子蘑菇 2026-04-06 10/500 2026-04-08 11:43 by zzucheup
[考研] 调剂求助（生物与医药） +6 @6952 2026-04-06 6/300 2026-04-07 23:52 by lys0704
[考研] 一志愿西电085401求调剂 +4 sunw1306 2026-04-07 4/200 2026-04-07 16:40 by 啵啵啵0119
[考研] 307求调剂 +3 所念及所望 2026-04-06 3/150 2026-04-06 17:30 by 土木硕士招生
[考研] 一志愿安徽某211 0703化学总分339求调剂 +7 晚风不晚 2026-04-04 7/350 2026-04-06 14:06 by houyaoxu
[考研] 一志愿上海海洋大学083200食品学硕，求调剂，接受其他专业083200 +4 what张 2026-04-04 5/250 2026-04-05 14:07 by chw1980_0
[考研] 调剂 +9 19945159693 2026-04-03 10/500 2026-04-04 20:16 by dongzh2009
[考研] 295求调剂 +3 尚偌呀 2026-04-03 4/200 2026-04-03 21:23 by zhq0425
[考研] 学硕288调剂!!! +3 小王xw123 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:20 by 啵啵啵0119
[考研] 一志愿华中农业071010，总分320求调剂 +7 困困困困坤坤 2026-04-02 7/350 2026-04-03 17:26 by Yuena_Wang
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭