24小时热门版块排行榜    

查看: 4329  |  回复: 19
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

KEVIN_LOVE

木虫 (正式写手)

[求助] 这样的跑胶结果让我很崩溃 已有11人参与

我是名实验新手,最近扩基因,为什么老是出现这种情况??好几次我都快崩溃了。退火温度58-61度,(这次maker没跑开,跑开了也是这样的结果)。前几次还会出现各种各样的意想不到的结果,有时有目的条带,但是前后都会有很长的“尾巴”,真心不知道怎么回事了。我都快崩溃了,各位神,指导一下吧。感激不尽。
这样的跑胶结果让我很崩溃
IMG_20131212_204454.jpg
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

mouhaobin

铁杆木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by KEVIN_LOVE at 2013-12-13 21:57:16
我用的是1的胶,100毫升加1克琼脂糖,微波炉里加热5分子,然后加10微升Dured,再加热2分钟,倒胶,凝固20多分钟,之后跑胶。每次我摸着都凝固了啊...

煮沸了有没有摇匀?胶不均匀,对电泳的影响很大的。煮沸了要拿出来摇几下,这样反复3次。用DuRed是没有问题的,所以你这个现象可以排除核酸染料的问题。还有跑胶的电压也很重要的
14楼2013-12-14 13:27:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 20 个回答

lihe131

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-12-13 15:26:24
根据我的经验,很有可能是引物特异性的问题,或者聚合酶太差了。
2楼2013-12-12 23:30:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2013-12-13 15:26:31
模板是什么,PCR前是否定量或者跑胶检测?
3楼2013-12-13 00:28:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三蛰

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
把你pcr的体系说一下,看看是不是模版加多了等问题……
我不会!
4楼2013-12-13 08:38:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
信息提示
请填处理意见