版块导航: 正在加载中...

登录注册

应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜

返回列表

wcj668899

至尊木虫 (文坛精英)

教师

应助: 140 (高中生)
金币: 32516.8
红花: 39
帖子: 15533
在线: 1807.5小时
虫号: 1252571
注册: 2011-04-01
性别: GG
专业: 无机合成和制备化学

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1

原理需要进一步吃透！
祝你成功！！

赞一下(1人)

回复此楼

抓紧努力，狠抓重点，省时高效，再创辉煌。

11楼2013-12-12 06:47:15

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

竹子小小

木虫 (小有名气)

应助: 49 (小学生)
金币: 1567.2
散金: 160
红花: 4
帖子: 200
在线: 157.3小时
虫号: 1972495
注册: 2012-09-04
专业: 微生物资源与分类学

引用回帖:

6楼: Originally posted by 摩羯的心 at 2013-12-11 16:19:48
除了模板浓度不一样，其他的条件都一样，请问基因组PCR中模板的量一般是多少，我一般都是加入2ul，模板浓度一般为多少啊...

不知道你的是什么东西，我的是水稻的，每次10ul加0.5,不知道是多少浓度。

赞一下

回复此楼

12楼2013-12-12 10:10:54

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

Genseer

新虫 (著名写手)

应助: 84 (初中生)
金币: 2547.9
红花: 8
帖子: 1068
在线: 42.7小时
虫号: 2196580
注册: 2012-12-20
专业: 植物保护学

引用回帖:

9楼: Originally posted by 摩羯的心 at 2013-12-11 17:11:29
但就算是引物跨内含子那不是也只会扩增到的目的条带比理论上的片段长，也不会出现这么多条杂带吧？还有我扩增到的目的条带测序后与设计引物所用的mRNA序列相似性为99%，那这样是不是说明，这个基因没有内含子呢？...

理论上，可能扩增不出目的条带，因为引物位置正好跨内含子和外显子区域。如果测序结果证明是目的条带，而且模板是纯的基因组DNA，说明引物的位置没有跨内含子和外显子区域。最后，相似性只有99%，是否说明目的基因并非单拷贝呢？

赞一下

回复此楼

13楼2013-12-12 11:13:13

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

摩羯的心

铁虫 (小有名气)

应助: 1 (幼儿园)
金币: 232.3
散金: 41
帖子: 88
在线: 18.8小时
虫号: 1937844
注册: 2012-08-14
专业: 农业昆虫学

引用回帖:

10楼: Originally posted by cicelyzh at 2013-12-12 02:19:09
是的。一般设计RT-PCR时的引物会设计在不同外显子里，这样很容易区分gDNA扩增产物和cDNA扩增产物。
引物特异性好不好不仅和引物有关，也和扩增的模板有关。设计引物时一般要根据模板来blast。此外，PCR条件控制不 ...

我还想问一下怎么对引物进行blast呀？谢谢

赞一下

回复此楼

14楼2013-12-12 14:38:03

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖