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虾头蟹壳

金虫 (初入文坛)

[求助] 安捷伦1100 色谱上突然多出不知道的峰!!!各种洗也没洗掉!怎么解决?

用的是乙腈和水体系,乙腈和水中各溶有高氯酸和浓磷酸,自己测过水相的pH大致在2左右。紫外220,梯度洗脱。C18反向柱
之前做的好好的,这几天,打发现想要的峰一个没有,不要的峰全出来了!
今天试了一下打纯水,走基线用90%水相,10%乙腈,基线很平。而后进高纯水(电导率18.25)后,发现有三个地方(2左右,3.8左右和12左右)出了很大的峰!进第二针高纯水,前两个峰略有减小,但不明显。打了三次纯水,峰(都是我不需要的峰,但是正好在我要看的位置)还是很大,后来进了一针空样,发现峰前两个峰没了,后面的峰还是出来了!但是原来打这三个峰都是没有的...不知道怎么回事...

还有想问一下,如果柱子冲塌了会出现这种现象么?因为1.期间有一个时间压力突然飚的很高,后来人为调下来了,进样后压力正常所以没管;2.pH比较低且含磷酸盐,所以最后冲柱子的时候会每次先用纯水冲15分钟后再用95%的水和5%的冲半个到一个小时,这个两个操作会不会把柱子冲垮?(柱子用到现在用了一年半)

ps,这次打之前老师另外用同一台机子做过GPC,用的THF和DMF两种,但是已经用水冲了2个小时,这个对我这个是不是也会有影响?
求高手能帮助一下!谢谢了!
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