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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞污染的鉴别
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蓝默儿

金虫 (小有名气)

[求助] 细胞污染的鉴别 已有1人参与

想探讨下杂交瘤细胞污染的鉴别方法，包括细菌污染、真菌污染。以及补救方法。
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微笑，自信，加油
1楼 2013-12-03 22:27:45
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-15 08:31:06
蓝默儿: 金币+1 2014-01-23 08:33:56
如果污染的话，2-3天就会有大量微生物而且培养基明显变黄。营养不好会使杂交瘤生长不好。
也可以在无菌环境下取培养基样品和阴性对照样品，加到细菌培养基中看会不会长菌。
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5楼2014-01-14 18:34:39
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Endless100

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-12-04 18:49:41
蓝默儿: 金币+1 2013-12-10 11:06:00
细胞污染了基本没救了  扔掉吧  我以前还有看  要是做单抗的细胞有污染的话 有人把细胞打到小鼠腹腔  然后抽出腹水 分离 细胞
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2楼2013-12-04 17:34:02
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蓝默儿

金虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Endless100 at 2013-12-04 17:34:02
细胞污染了基本没救了  扔掉吧  我以前还有看  要是做单抗的细胞有污染的话 有人把细胞打到小鼠腹腔  然后抽出腹水 分离 细胞

我是确定不了是不是污染，一定不是真菌污染，也不像细菌污染，但杂交瘤细胞就是长不起来，长着长着就飘了，然后脱落，萎缩，死亡。
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微笑，自信，加油
3楼2013-12-06 09:44:39
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314300420

捐助贵宾 (著名写手)
★ ★ ★
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-01-15 08:31:00
引用回帖:
3楼: Originally posted by 蓝默儿 at 2013-12-06 09:44:39
我是确定不了是不是污染，一定不是真菌污染，也不像细菌污染，但杂交瘤细胞就是长不起来，长着长着就飘了，然后脱落，萎缩，死亡。...

我也做单抗，经常遇到此类问题，根据经验可以加饲养细胞，杂交瘤状态会有明显好转。个人分析原因主要有三种，1是融合前SP2/0状态不是很好，这样融合后即使有成功的克隆，杂交瘤状态也很难达到旺盛的程度，即使打小鼠腹腔活化；2是血清质量不够好；3是支原体污染。个人最担心第三种情况，但也请教过经验丰富的老师，对方说国内实验室这种环境基本上支原体是广泛存在的，只要适应了，杂交瘤是可以长好的，不必过多担心支原体。
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4楼2014-01-13 11:48:25
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