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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大神们~~~求PCR指导
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weishunshun

新虫 (小有名气)

[求助] 大神们~~~求PCR指导 已有1人参与

小女已经潜心做分子微生物实验快两个月了~~不断受挫~土壤DNA是用试剂盒提的~~但是腐殖酸浓度较高~~PCR屡试不成功~~最好的情况下是PCR有条带但非常不亮~~一点都不亮~~只能隐约看到有亮带~~后来又手提了一部分~~浓度倒是挺好~但是杂质还是非常多~做了个胶纯化~~然后再做的PCR~倒是能p出来~~但是还不亮~~为神马总是不亮~~~不亮我就做不了DGGE做不了DGGE我就不能往下做~~求大神指点~~~为什么啊~~难道真是人品不行啊~~怎么样人品才能好啊
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苦逼苦逼~~~
1楼 2013-12-03 17:10:12
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heijiwang

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

问题出在引物上，引物再换一下，我用的314f和518r,最好2μL引物，59°退火，35个循环，祝你成功！
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23楼2013-12-06 17:20:20
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zzl2516

金虫 (小有名气)
marker亮么。。。
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2楼2013-12-03 17:41:52
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weishunshun

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zzl2516 at 2013-12-03 17:41:52
marker亮么。。。

marker也不是很亮~~但是比PCR条带亮多了
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苦逼苦逼~~~
3楼2013-12-03 17:44:01
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一生的约定

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by weishunshun at 2013-12-03 17:44:01
marker也不是很亮~~但是比PCR条带亮多了...

我也要做这些，到现在还没做到这步

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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广交益友，多多学习！
4楼2013-12-03 22:20:14
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