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韩蕾6862

新虫 (初入文坛)

你的问题现在解决了吗?我也遇到了相同的问题,花了很长时间了
11楼2014-11-28 20:26:02
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Gooder321

新虫 (初入文坛)

是单交换吧,你还需要进行蔗糖的双交换筛选
12楼2015-06-19 10:47:46
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liuan6126

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

首先确定你的宿主是几倍体吧?再,并未见到阴性、阳性对照。最后,确定你的敲除框在质粒中的位置是否处于同源重组双臂的中间。
13楼2015-06-19 13:40:45
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guoqin_shiyin

银虫 (正式写手)

同源壁太短了,我当时敲除的时候上下游同源臂各有200bp基本一敲一个准。而且你的基因是否在基因组上是单拷贝?由于你的目的基因太短,用引物扩增时候很容易有非特异性扩增,建议敲除引物设计要长一点

[ 发自小木虫客户端 ]
14楼2015-06-19 22:28:43
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