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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » DGGE求助？
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开云者

铜虫 (正式写手)

[求助] DGGE求助？

以前做DGGE都没有问题（空白），可是最近做了两次一直没有成功，不知道什么原因？求高手指点。条件：25%-55%，先200V10分钟，然后150V跑6h。
DGGE求助？
现在做的.jpg


DGGE求助？-1
这是上图的PCR.jpg


DGGE求助？-2
这是之前做的.jpg
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挥霍不起青春
1楼 2013-12-02 19:15:00
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liugs

禁虫 (正式写手)
感谢参与，应助指数 +1
本帖内容被屏蔽
2楼2013-12-03 08:28:51
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开云者

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liugs at 2013-12-03 08:28:51
感觉是PCR产物的问题了！

但是PCR的琼脂糖对啊，是2000的MARKER，跑出来的也接近250bp
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挥霍不起青春
3楼2013-12-03 13:28:28
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久久季雨

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
PCR产物浓度估计比较小。
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我就是我！带不了假面具
4楼2013-12-04 09:47:59
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liugs

禁虫 (正式写手)
本帖内容被屏蔽
5楼2013-12-04 11:04:30
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wairi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我觉得PCR的产物浓度足够跑出好看的DGGE图谱，你再确认一下PCR有没有问题。另外再仔细想想DGGE时所用的试剂（别忘记水），染色时间，电泳条件等等是不是有什么变化？希望能帮到你。
赞一下 回复此楼
6楼2013-12-04 16:50:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

开云者

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by wairi at 2013-12-04 16:50:04
我觉得PCR的产物浓度足够跑出好看的DGGE图谱，你再确认一下PCR有没有问题。另外再仔细想想DGGE时所用的试剂（别忘记水），染色时间，电泳条件等等是不是有什么变化？希望能帮到你。

恩，谢谢，今天让又做了次，怀疑是宝生物合成的GC夹引物有问题，今天和别的厂家的引物一块跑的DGGE，一会看看结果
赞一下 回复此楼
挥霍不起青春
7楼2013-12-04 17:10:02
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Hazel张健

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 开云者 at 2013-12-04 17:10:02
恩，谢谢，今天让又做了次，怀疑是宝生物合成的GC夹引物有问题，今天和别的厂家的引物一块跑的DGGE，一会看看结果...

楼主问题解决了吗？是引物问题~？！
赞一下 回复此楼
8楼2014-01-23 16:40:00
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开云者

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by Hazel张健 at 2014-01-23 16:40:00
楼主问题解决了吗？是引物问题~？！...

解决了，是试剂的问题，试剂买的不好
赞一下 回复此楼
挥霍不起青春
9楼2014-01-23 20:27:19
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