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开云者

铜虫 (正式写手)

[求助] DGGE求助?

以前做DGGE都没有问题(空白),可是最近做了两次一直没有成功,不知道什么原因?求高手指点。条件:25%-55%,先200V10分钟,然后150V跑6h。
DGGE求助?
现在做的.jpg


DGGE求助?-1
这是上图的PCR.jpg


DGGE求助?-2
这是之前做的.jpg
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挥霍不起青春
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liugs

禁虫 (正式写手)

感谢参与,应助指数 +1
本帖内容被屏蔽

2楼2013-12-03 08:28:51
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开云者

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by liugs at 2013-12-03 08:28:51
感觉是PCR产物的问题了!

但是PCR的琼脂糖对啊,是2000的MARKER,跑出来的也接近250bp
挥霍不起青春
3楼2013-12-03 13:28:28
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久久季雨

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
PCR产物浓度估计比较小。
我就是我!带不了假面具
4楼2013-12-04 09:47:59
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liugs

禁虫 (正式写手)

本帖内容被屏蔽

5楼2013-12-04 11:04:30
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wairi

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我觉得PCR的产物浓度足够跑出好看的DGGE图谱,你再确认一下PCR有没有问题。另外再仔细想想DGGE时所用的试剂(别忘记水),染色时间,电泳条件等等是不是有什么变化?希望能帮到你。
6楼2013-12-04 16:50:04
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开云者

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by wairi at 2013-12-04 16:50:04
我觉得PCR的产物浓度足够跑出好看的DGGE图谱,你再确认一下PCR有没有问题。另外再仔细想想DGGE时所用的试剂(别忘记水),染色时间,电泳条件等等是不是有什么变化?希望能帮到你。

恩,谢谢,今天让又做了次,怀疑是宝生物合成的GC夹引物有问题,今天和别的厂家的引物一块跑的DGGE,一会看看结果
挥霍不起青春
7楼2013-12-04 17:10:02
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Hazel张健

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 开云者 at 2013-12-04 17:10:02
恩,谢谢,今天让又做了次,怀疑是宝生物合成的GC夹引物有问题,今天和别的厂家的引物一块跑的DGGE,一会看看结果...

楼主问题解决了吗?是引物问题~?!
8楼2014-01-23 16:40:00
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开云者

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by Hazel张健 at 2014-01-23 16:40:00
楼主问题解决了吗?是引物问题~?!...

解决了,是试剂的问题,试剂买的不好
挥霍不起青春
9楼2014-01-23 20:27:19
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