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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Reverse transcription-polymerase chain reaction
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small_fish

银虫 (小有名气)

[求助] Reverse transcription-polymerase chain reaction

我在做逆转录聚合酶链反应 结果直接跑胶的（不好意思 各位大神 小弟是药理学的 刚学这玩意 如有不多 请多指教啊）
测定RNA含量后 转录成cDNA 我听说可以不测定RNA含量 凭经验直接转录（……大神啊） 这到底靠不靠谱啊？
还有想借用Real-time PCR中的引物（产物只有80bp左右） 我担心跑胶会分不开啊 能直接拿过来用吗？
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药理小鼠坑爹啊
1楼 2013-11-29 23:38:09
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yang0071

木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
新手还是按照说明书一步一步来做
没人带你吗?
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2楼2013-11-30 06:32:16
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small_fish

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by yang0071 at 2013-11-30 06:32:16
新手还是按照说明书一步一步来做
没人带你吗?

恩 我是唯一一个学生 老板经常出差 我都得自己摸索 自己问 自己做
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药理小鼠坑爹啊
3楼2013-11-30 09:17:02
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deng神之刺客

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-12-01 21:08:21
small_fish: 金币+3, ★有帮助 2013-12-03 19:21:20
新手的话按试剂盒说明来呗，做的多了根据RNA电泳条带的亮度可以估计其浓度，就不用非得测RNA浓度，凭经验加可以了
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4楼2013-11-30 11:00:15
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small_fish

银虫 (小有名气)
引用回帖:
4楼: Originally posted by deng神之刺客 at 2013-11-30 11:00:15
新手的话按试剂盒说明来呗，做的多了根据RNA电泳条带的亮度可以估计其浓度，就不用非得测RNA浓度，凭经验加可以了

不好意思 我问个问题 我们也有人 不跑RNA 直接测完浓度 然后换算到1微克 再转成cDNA
然后看下GAPDH齐不齐就行了！ 这样也可以吗
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药理小鼠坑爹啊
5楼2013-12-01 20:41:40
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deng神之刺客

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

做的多了对自己提的RNA质量放心完全可以呀，不过新手还是看看电泳结果比较好
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6楼2013-12-01 20:52:39
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running113

木虫 (著名写手)
我也在做这个，不过还好实验室里有人指导。
废劲少一些。
楼主还是先按照说明书上说的来做吧。
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SCI我来了！！！
7楼2013-12-02 00:10:57
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running113

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
5楼: Originally posted by small_fish at 2013-12-01 20:41:40
不好意思 我问个问题 我们也有人 不跑RNA 直接测完浓度 然后换算到1微克 再转成cDNA
然后看下GAPDH齐不齐就行了！ 这样也可以吗...

应该就是这么做的。
不知你想做什么？
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SCI我来了！！！
8楼2013-12-02 00:11:53
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