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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 求助，最近做液相遇到各种问题，求解析
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98sj

金虫 (小有名气)

[求助] 求助，最近做液相遇到各种问题，求解析

最近用液相分离物质，该物质是从细菌发酵液萃取获得，用甲醇萃取的，想分离单一成分化合物，用的C18的柱子，流动相：90%超纯水 10%甲醇5分钟 ；依次梯度洗脱至0%超纯水 100%甲醇 30分钟，出峰时间在10分钟内，且峰都分不开；想问怎么换改变条件？
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1楼 2013-11-28 21:46:51
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phoebecheng

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

除了这几个目标峰，杂质多吗？杂质多，你可以再纯化一步，萃取或过短粗柱等；
如果不是，你的出峰比较早，你可以把梯度变缓和，还是不行，就用耐水柱分，把有机相比例降低；
你最好能查到结构的部分信息，看看如何调整流动相的PH值等来调节。
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13楼2013-12-09 13:36:33
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寒雨葭

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个流动相是你查的文献的么？怎么用甲醇萃取呀。。甲醇溶于水也溶于有机相。。就算用甲醇萃，说明甲醇对你需要的物质溶解度很好，流动相中用甲醇，物质都随着流动相跑出来了，自然分不太开。。

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98sj
寒雨葭，字淼炎。
2楼2013-11-28 22:49:29
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98sj

金虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
2楼: Originally posted by 寒雨葭 at 2013-11-28 22:49:29
这个流动相是你查的文献的么？怎么用甲醇萃取呀。。甲醇溶于水也溶于有机相。。就算用甲醇萃，说明甲醇对你需要的物质溶解度很好，流动相中用甲醇，物质都随着流动相跑出来了，自然分不太开。。
...

嗯，查的文献，具体说用甲醇提取，我是先把发酵液浓缩至固体，然后用甲醇提取的，甲醇提取物里有我想要的东西，这个已经检测过，不是做液相要分离的物质最好用流动相来溶解吗？！我们实验室都是这样啊，如果你用乙腈做流动相，要分离的物质最好用乙腈溶解，这样不容易出杂峰，更精确
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3楼2013-11-29 15:13:51
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寒雨葭

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
3楼: Originally posted by 98sj at 2013-11-29 15:13:51
嗯，查的文献，具体说用甲醇提取，我是先把发酵液浓缩至固体，然后用甲醇提取的，甲醇提取物里有我想要的东西，这个已经检测过，不是做液相要分离的物质最好用流动相来溶解吗？！我们实验室都是这样啊，如果你用乙 ...

汗~你帖子上说是甲醇萃取的。。只是用甲醇提取的啊。。你提取的东西性质是啥？~根据性质改流动相和柱子吧。。

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寒雨葭，字淼炎。
4楼2013-11-29 15:59:51
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