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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 综合其他 » 激光共聚焦显微镜激发光源与荧光仪最大激发波长不同
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wensome

木虫 (正式写手)

[求助] 激光共聚焦显微镜激发光源与荧光仪最大激发波长不同

题目有些绕，我仔细说说我遇到的情况:我的一个荧光探针，在荧光仪上最大激发波长是380，最大发射是505。做细胞的时候由于实验室的激光共聚焦显微镜只有一个488的光源，于是试着激发了一下细胞，发现竟然可以激发，细胞染色，且效果还挺好。我的问题:在荧光仪上488几乎不能激发探针，最大激发在380，但是为啥在激光共聚焦显微镜下用488的激光光源可以激发细胞？？这种情况正常否？

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1楼 2013-11-28 00:12:00
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conanzzz

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
137167741: 小木虫交流，共同进步~~ 2013-11-28 14:51:13
那用荧光仪扫激发谱是什么情况
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2楼2013-11-28 10:59:57
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wensome

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by conanzzz at 2013-11-28 10:59:57
那用荧光仪扫激发谱是什么情况

扫激发，最大激发在380左右

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2013-11-28 14:10:23
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conanzzz

木虫 (正式写手)
引用回帖:
3楼: Originally posted by wensome at 2013-11-28 14:10:23
扫激发，最大激发在380左右
...

激发谱里面488完全不能激发么?还是说没有380激发的强;按说荧光仪的灵敏度更高
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4楼2013-11-28 14:47:33
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wensome

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by conanzzz at 2013-11-28 14:47:33
激发谱里面488完全不能激发么?还是说没有380激发的强;按说荧光仪的灵敏度更高...

荧光激发488完全不能激发。我在考虑是不是老师把信号检测放到最大导致的呢
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5楼2013-11-30 13:32:28
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conanzzz

木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by wensome at 2013-11-30 13:32:28
荧光激发488完全不能激发。我在考虑是不是老师把信号检测放到最大导致的呢...

会不会共聚焦那块儿的参数不对,488激发是假象
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6楼2013-12-02 14:07:47
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doglet

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

阴性对照发光吗，如果发光说明假阳性，还有共聚焦的488的激发光谱是多少至多少，会不会有少量重叠
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7楼2013-12-02 15:14:26
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loveford

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

可能是因为你的荧光380-505之间，而confocal的488在这个范围内，所以可以激发的细胞。猜测的，希望可以帮到你~
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8楼2013-12-02 15:31:08
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错季的守望

金虫 (著名写手)
我也遇到了同样问题，请问您后面怎么解决呢

发自小木虫Android客户端
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9楼2017-05-18 10:23:11
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